Пластинки HiDip

Условия лаборатории не требуются! Пластинки HiDip–ваши три инструмента в одном для: обнаружения, идентификации, подсчета возбудителей инфекций:
Погружной тест (исследование жидкостей): Смачивание -> Инкубирование -> Учет результата
Тест смачивания (исследование жидкостей): Смачивание -> Инкубирование -> Учет результата
Тест отпечатков (исследование поверхностей): Отпечаток -> Инкубирование -> Учет результата

Принцип действия: пластинка HiDip – это приспособление для выделения, подсчета и идентификации специфических бактерий в моче, пищевых продуктах и пробах воды. Ее можно использовать также для определения микробной контаминации поверхностей. Пластинки HiDip специально разработаны для микробиологического исследования жидкостей (например, мочи, молока, воды) и поверхностей оборудования и инструментов, используемых в клинике или в пищевой промышленности.

Двусторонняя Пластинка HiDip состоит из гибкой пластиковой основы, несущей на своих поверхностях две агаровые среды. В случае комбинации трех питательных сред пластинки HiDip представляют собой трехгранную пластиковую призму, на сторонах которой расположены соответствующие агаровые среды. Выступающая поверхность агара, а также гибкость соединений устройства при этом позволяет делать отпечатки с исследуемых поверхностей. Основа пластинки разделена на 10 зон по 1 см² каждая, что позволяет рассчитать степень микробной контаминации поверхности на единицу площади.

Пластинки HiDip выпускаются с 12 сочетаниями двух или трех агаров (упаковка содержит 5 или 10 контейнеров с пластинками HiDip).

Способы применения

Поверхности: Отвинчивают колпачок и достают пластинку HiDip из контейнера, не касаясь агаровых поверхностей. Следует проверить среды на признаки контаминации и усыхания. Прикладывают агар к исследуемой поверхности и прижимают его к ней, согнув приспособление по линии соединения пластинки с колпачком. Следует применять равномерное и достаточное по силе давление на пластинку в течение нескольких секунд. Манипулировать с пластинкой надо осторожно, чтобы агар не остался на исследуемой поверхности. Процедуру повторяют на смежном участке поверхности, используя вторую питательную среду. Затем пластинку возвращают в контейнер и плотно закрывают его. Инкубируют пластинки в вертикальном положении при указанной температуре.

Жидкости: Отвинчивают колпачок и достают пластинку HiDip из контейнера, не касаясь агаровых поверхностей. Следует проверить среды на признаки контаминации и усыхания. Погружают пластинку в исследуемую жидкость так, чтобы она покрыла всю поверхность агара (если жидкости не хватает, то ею смачивают всю поверхность агара). Дают жидкости стечь. Затем пластинку возвращают в контейнер и плотно закрывают его. Инкубируют пластинки в вертикальном положении при указанной температуре. На контейнере указывают номер пробы, источник, дату, время и пр.

Учет результатов: проводят после извлечения пластинки из контейнера. Сравнивают густоту роста колоний на поверхности агара со специальной схемой. Если уровень контаминации очень высокий (более 10⁷ КОЕ/мл) или жидкость вязкая, рекомендуется приготовить соответствующие разведения материала и исследовать его повторно. Рост 1 колонии (пятна) на агаре можно рассматривать как уровень 10² КОЕ/мл. При отсутствии роста на агаре выдается ответ, что уровень контаминации меньше, чем 10² КОЕ/мл.

Хранение и срок годности:

Пластинки HiDip хранят при 15° С или при 15-25° С. Срок годности указан на каждой упаковке.

Утилизация:

С использованными пластинками HiDip надо обращаться с осторожностью, так как на них содержатся живые микроорганизмы. Перед выбрасыванием их автоклавируют или сжигают, однако, если такие возможности отсутствуют, их можно на ночь погрузить (полностью) в дезинфицирующий раствор (например, феноловый).

Среды, используемые в различных комбинациях на пластинках HiDip

Цистин-лактозо-электролит-дефицитный агар (CLED-агар)

Среда рекомендуется для выделения, подсчета и идентификации возбудителей мочевых инфекций по ферментации лактозы. Пластинки после инокуляции инкубируют при 35-37° С 18-24 ч и отмечают характер роста.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): зеленовато-голубой

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Агар МакКонки

Среда в качестве дифференциальной рекомендуется для селективного выделения энтеробактерий и близких к ним микроорганизмов. Ее готовят в соответствии рекомендациями американской Фармакопеи. Она содержит кристаллический фиолетовый, хлорид натрия и соли желчных кислот, в результате чего на ней подавляется рост многих грамположительных микроорганизмов, включая стафилококков. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С. Колиформные бактерии образуют розовые или красные колонии, а вокруг колоний Escherichia coli выпадает преципитат.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Красный с лиловым оттенком

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35° С

Агар с цетримидом

Эта селективная среда используется для выделения Pseudomonas aeruginosa из гноя, мокроты, сточных вод и др. На ней можно определять продукцию флюоресцеина и пиоцианина. Цетримид подавляет рост микроорганизмов, не относимых к Pseudomonas aeruginosa. Через 24-48 ч при 35-37° С на этой среде вырастают колонии Pseudomonas aeruginosa, окрашенные в синий или сине-зеленый цвет.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный

Ростовые характеристики через 24-48 ч при 35-37° С

Желчно-эскулиновый агар

Эта среда рекомендована специалистами АРНА для предварительной идентификации стрептококков группы D. Она рекомендована также международным комитетом ISO для выделения и идентификации Yersinia enterocolitica. Некоторые бактерии гидролизуют эскулин с образованием эскулетина и глюкозы. Последний реагирует с цитатом железа, в результате чего образуется комплекс коричнево-черного цвета. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Желтый

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Примечание:
"+" - почернение среды,
"–" - цвет среды не изменен.

Агар Сабуро с глюкозой

Среду используют для культивирования грибов, в частности тех, которые вызывают инфекции кожи. В соответствии с рекомендациями американской Фармакопеи, ее используют также для определения грибов в ходе санитарно-микробиологических исследований. Ростовые характеристики культур определяют через 48-72 ч инкубирования пластинок при 30° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный

Ростовые характеристики через 48-72 ч при 30° С

Агар МакКонки с MUG (МУГ)

Среду используют для селективного выделения и определения лактозоферментирующих, колиформных, микроорганизмов методом флюоресценции. Обнаружение фермента b -глюкоронидазы позволяет быстро определять Escherichia coli в смешанных культурах. Микробный фермент расщепляет МУГ с образованием 4-метилумбеллифера, который дает сине-зеленое свечение при ультафиолетовом облучении. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Красный с лиловым оттенком

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Примечание: флюоресценцию отмечают при УФО с длиной волны 366 нм

Среда HiCrome UTI

Эту дифференциальную среду рекомендуют для определения и идентификации возбудителей мочевых инфекций. На ней облегчается и ускоряется идентификация некоторых грамположительных и грамотрицательных бактерий, ввиду того, что она содержит два хромогенных субстрата, которые по-разному разлагаются родо- и видоспецифическими ферментами бактерий. Ростовые характеристики культур определяют через 24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С. Дальнейшую идентификацию Escherichia coli проводят с помощью теста на индол при использовании реактива DMACA (R035), а идентификацию протеев – с использованием реактива TDA (R036).

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-янтарный

Ростовые характеристики через 24 ч при 35-37° С

Триптон-соевый агар

Среда рекомендуется для культивирования широкого круга микроорганизмов и готовится в соответствии с рекомендациями американской Фармакопеи. Ростовые характеристики культур определяют через 18-48 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый

Ростовые характеристики через 18-48 ч при 35-37° С

Агар с бенгальским розовым для грибов

Эту среду рекомендуют для селективного выделения дрожжевых и плесневых грибов из объектов внешней среды и пищевых материалов. Колони грибов окрашиваются бенгальским розовым, что облегчает их подсчет. Ростовые характеристики культур определяют через 5 дней инкубирования пластинок при 20-25° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Красный

Ростовые характеристики через 5 дней при 20-25° С

Питательный агар для определения микробного числа (PCA)

Среда рекомендована (APHA, FDA, ISO) для определения микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и стоках. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Среда VRBA

Эта селективная среда используется для определения и подсчета колиформных бактерий в воде и пищевых продуктах. Она рекомендована комитетом ISO для подсчета колиформных бактерий. Селективные свойства среды обусловлены присутствием в ней желчных солей и кристаллического фиолетового. Быстро ферментирующие лактозу бактерии формируют на ней красные колонии, окруженные красно-лиловой зоной. Колонии бактерий, не ферментирующих или медленно ферментирующих лактозу, бледные. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Красновато-лиловый

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Сульфатная среда API

В соответствии с рекомендациями специалистов Американского нефтяного института (API), среда используется для определения и подсчета сульфатредуцирующих бактерий. Последние превращают сульфат в сульфид, который, реагируя с ионами железа, образует соединение черного цвета. Ростовые характеристики культур определяют через 1 неделю инкубирования пластинок при 30° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Светло-желтый

Ростовые характеристики через 1 неделю при 30° С

Среда РА

Среду используют для определения колиформных бактерий в питьевой воде после ее обработки и из разводящей сети, молоке и других пищевых продуктах. Она соответствует требованиям американского стандарта (АРНА). Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Лиловый

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Сероводородная среда

Эту среду рекомендуют для одновременного определения сальмонелл, вибрионов, цитробактеров и Escherichia coli в воде, молоке и других пищевых продуктах. Наличие роста, с изменением или без изменения цвета среды, свидетельствует о микробной контаминации пробы. Ростовые характеристики культур определяют через 18-24 ч инкубирования пластинок при 35-37° С.

Культуральные свойства:

Цвет незасеянной среды (контроль): Голубой

Ростовые характеристики через 18-24 ч при 35-37° С

Упаковка из 5 пластинок

Пластинка HiDip с тремя средами

Извлекаем контейнер с пластинкой из коробки -> Отвинчиваем крышку и достаем пластинку -> погужаем - или - смачиваем - или - делаем отпечаток -> возвращаем пластинку в контейнер -> инкубируем -> учитываем результаты посева

Схема определения концентрации микроорганизмов(КОЕ/мл, КОЕ/см2)
бактерий	бактерий	грибов
Жидкости	Поверхности	Жидкости и поверхности

Отвинчиваем крышку и достаем пластинку из контейнера -> делаем отпечаток одной средой ... другой ... третьей -> возвращаем пластинку в контейнер и инкубируем

Пластинки HiDip – Погружение/Смачивание/Отпечаток -> Инкубирование -> Учет результата