Brewer Thioglycolate / Modified Тиогликолевая среда по Бреверу / Тиогликолевая среда модифицированная

М019 / М195

Тиогликолевую среду по Бреверу применяют для определения стерильности биологических и других материалов.

Состав**:

Ингредиенты	М019 грамм/литр	М195 грамм/литр
Протеозопептон	10,00	–
Мясной настой (из говядины)	500,00	–
Гидролизат казеина	–	17,00
Папаиновый перевар соевой муки	–	3,00
Глюкоза	5,00	10,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Калия гидрофосфат	2,00	2,00
Натрия тиогликолят	0,50	1,00
Метиленовый синий	0,002	0,002
Агар-агар	0,50	0,50
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 40,5 г порошка М019 или 38,5 г порошка М195 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки или флаконы и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Тиогликолятная среда дана по прописи Brewer (1, 2), а модифицированная тиогликолятная среда – по прописи среды Linden (3). Тиогликолятная среда по Бреверу содержит высокопитательный протеозопептон и мясной настой, необходимые для обильного роста даже притязательных микроорганизмов. Тиогликолят натрия помогает создать анаэробные условия и, кроме того, нейтрализует токсическое действие соединений ртути, которые могут содержаться в исследуемом материале. Очень небольшое количество агар-агара поддерживает в среде на дне пробирки анаэробные условия. Метиленовый синий указывает на содержание кислорода в среде (в присутствии кислорода среда окрашивается в зелено-синий цвет). Незасеянная среда в верхней части имеет сине-зеленый цвет, что указывает на присутствие в данной части кислорода. Если окрашенная в сине-зеленый цвет часть составляет более 20% среды (за счет растворенного кислорода), то перед использованием для удаления кислорода ее надо прогреть 5-10 мин в струе пара. Приготовленную среду до использования рекомендуется хранить в темноте.

Модифицированная среда содержит большее количество тиогликолята и рекомендуется для проверки стерильности различных материалов.

Ферментирующие глюкозу микроорганизмы ввиду снижения рН до критических значений после накопления в данной среде могут погибать.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, ее верхняя часть (до 10%) при стоянии окрашивается в голубовато-зеленый цвет.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М019 (4,05% вес/об) или М195 (3,85% вес/об) имеют рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
Bacteroides melaninogenicus (25848)	Обильный
Clostridium perfringens (11437)	Обильный
Streptococcus mitis (9895)	Обильный
Streptococcus pyogenes (19615)	Обильный

Ссылки:

1. Brewer, 1940, J. Bact., 39:10
2. Brewer,1940, J.A.M.A., 115:598.
3. Bulletin, National Institute of Health, 1941.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.