Vogel-Johnson Agar Base (V.J. Agar) Основа агара для стафилококков (по Вогелу-Джонсону)

M023

Этот агар с добавлением теллурита калия позволяет раньше выявлять колонии коагулазо- и маннитположительных Staphylococcus aureus.

 

 

Рост Staphylococcus aureus на агаре Фогеля-Джонсона (M023)

 

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм /литр
Гидролизат казеина	10,00
Дрожжевой экстракт	5,00
Маннит	10,00
Калия гидрофосфат	5,00
Лития хлорид	5,00
Глицин	10,00
Феноловый красный	0,025
Агар-агар	16,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 61,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить 20 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия (FD052). Осторожно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Предупреждение: Хлорид лития ядовит, поэтому следует избегать вдыхания порошка и попадания его на кожу. При попадании на кожу рекомендуется как можно скорее обильно промыть водой.

Принцип и оценка результата:

Этот агар готовится по прописи Vogel и Johnson (1), рекомендованной американской Фармакопеей (2) для определения микробной обсемененности. Первоначально теллурит-глициновая среда для селективного определения коагулазопложительных стафилококков разработана Zebovitz (3). Затем она была модифицирована (1) путем добавления индикатора рН фенолового красного и увеличения концентрации маннита.

Гидролизат казеина и дрожжевой экстракт служат источником азотистых питательных веществ, углерода, серы, витаминов группы В и микроэлементов. Фосфат обеспечивает буферные свойства среды. В течение первых 24 ч инкубирования рост большинства сопутствующих микроорганизмов подавляется теллуритом калия, хлоридом лития и высоким содержанием глицина. Подавляющее действие ингибиторов на Staphylococcus aureus компенсируется присутствием маннита и глицина. Коагулазоположительные стафилококки восстанавливают теллурит калия до свободного теллура и поэтому образуют черные колонии, окруженные желтыми зонами. Последние обусловлены изменением цвета индикатора фенолового красного под влиянием кислых продуктов ферментации маннита. При длительном инкубировании на среде могут вырастать черные колонии коагулазоотрицательных стафилококков.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий розовый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,6%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет красную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (6,1% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный	Черные с желтым ореолом
Staphylococcus epidermidis (12228)	Средний	Прозрачные, черноватые
Proteus mirabilis (25933)	Слабый	Черные
Escherichia coli (25922)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Vogel and Johnson, 1960, Public Health Lab., 18:131.
2. The United States Pharmacopeia and National Formulary, 1995, 23/16, United States Pharmacopeial Convention, Inc. Rockville, MD.
3. Zebovitz, Evans and Niven, 1955, J. Bacteriol., 70:686.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.