Deoxycholate Agar Дезоксихолатный агар

М030

Эту дифференциальную среду используют для обнаружения и прямого подсчета колиформных микроорганизмов в молочных продуктах, а также для селективного выделения возбудителей кишечных инфекций из фекалий, ректальных тампонов и другого материала.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00
Лактоза	10,00
Натрия дезоксихолат	1,00
Натрия хлорид	5,00
Калия гидрофосфат	2,00
Железа цитрат	1,00
Натрия цитрат	1,00
Нейтральный красный	0,03
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 45,0 г в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Избегать перегревания среды.

Принцип и оценка результата:

Этот агар готовят по модифицированной прописи Leifson (1). Его используют для селективного выделения возбудителей сальмонеллеза и шигеллеза. Высокая селективность позволяет густо засевать эту среду без опасения обильного роста сопутствующей микрофлоры. Для обычных исследований фекалий или мочи, наряду с этой средой рекомендуется применять другие, например, агар МакКонки (M082) или Висмут-сульфитный агар (M027). Посев на среду можно делать также с Селенитового бульона (M025A). Эту среду особенно рекомендуют для исследования ректальных тампонов и фекалий на шигеллы и сальмонеллы. Указанные микроорганизмы образуют на ней бесцветные колонии, а колиформные и грамположительные, в основном, подавляются дезоксихолатом, цитратом натрия и цитратом аммонийного железа. Колиформные бактерии в случае роста образуют розовые колонии.

Среду можно использовать для подсчета колиформных бактерий в молоке и сливках (2): внести 1-4 мл образца (или соответствующего десятикратного разведения образца) в стерильную чашку Петри и добавить 10-20 мл расплавленной и остуженной среды. После застывания среды нанести на ее поверхность 3-5 мл незасеянной среды и, после затвердения, инкубировать чашку в термостате при 30°С в течение 24 ч. Колиформные бактерии образуют темно-красные колонии (диаметром 0,5 мм).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий розоватый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет оранжево-красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (4,5% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Escherichia coli (25922)	Хороший	Розовые с преципитатом вокруг
Salmonella enteritidis (13076)	Хороший	Бесцветные
Salmonella typhimurium (14028)	Хороший	Бесцветные
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Leifson, 1935, J. Pathol. Bacteriol., 40:581.
2. APHA, ‘Standard Methods for the Examination of Dairy Products’, 1967, 12th ed., APHA Inc., New York, p -58.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.