Двухсахарный агар по Ресселю
Double Sugar Agar Russell | М057 |
Среду используют для дифференциации грамотрицательных бактерий кишечной группы по их способности ферментировать глюкозу и лактозу с образованием газа или без него.
Состав**:
Ингредиенты | грамм /литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 2,50 |
Гидролизат казеина | 7,50 |
Мясной экстракт | 3,00 |
Лактоза | 10,00 |
Глюкоза | 1,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Феноловый красный | 0,025 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Тщательно размешать 44,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить среду в необходимом количестве в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 0,9-1,1 атм (118-121°С) в течение 15 мин. Остудить в наклонном положении для формирования скошенной части и столбика.
Принцип и оценка результата:
Этот агар описан первоначально Russell (1). В приведенной формуле лакмус заменен на феноловый красный. Эту среду используют для дифференциации грамотрицательных бактерий кишечной группы, особенно эшерихий, сальмонелл и шигелл, по их способности ферментировать глюкозу и лактозу. Образование кислоты в ходе инкубирования определяют по изменению цвета индикатора фенолового красного в скошенной части (аэробная ферментация) и в столбике среды (анаэробная ферментация). На образование газа в ходе ферментации указывают пузырьки и разрывы среды в столбике. Такие микроорганизмы, как Salmonella typhi, ферментируют глюкозу, но не лактозу, поэтому сначала на короткое время скошенная часть закисляется. По мере расхода глюкозы в аэробных условиях выделяющиеся амины снова защелачивают среду. В анаэробных условиях (в столбике) среда остается кислой.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий розовый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,4% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-40 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Скос | Столбик | Газ |
|---|---|---|---|---|
Escherichia coli (25922) | Обильный | К | К | + |
Proteus vulgaris (13315) | Обильный | Щ | К | + |
Pseudomonas aeruginosa (27853) | Обильный | Щ | Щ | – |
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | Щ | К | + |
Shigella dysenteriae (13313) | Обильный | Щ | К | – |
Примечание:
К = кислая реакция, желтый цвет среды;
Щ = щелочная реакция, красный цвет среды;
Ссылки:
1. Russell, 1911, J. Med. Res., 25:217.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.