Среда для культивирования амеб
Entamoeba Medium | M077 |
Эту среду используют для культивирования Entamoeba histolytica.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Настой печени | 272,00 |
Протеозопептон | 5,50 |
Натрия b-глицерофосфат | 3,00 |
Натрия хлорид | 2,70 |
Агар-агар | 11,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 33,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Оставить для затвердевания в наклонном положении. Покрыть примерно половину скошенной части среды смесью (1:6) свежей лошадиной сыворотки и физиологического раствора и добавить 5 мм петлю рисового порошка, стерилизованного в печи при 160°С в течение 1 ч. СЛЕДУЕТ ИЗБЕГАТЬ СПЕКАНИЯ ПОРОШКА.
Принцип и оценка результата:
Эта среда разработана Cleveland и соавт. (1, 2) и является высоко специфичной для Entamoeba histolytica.. На ней не растут Endolimax nana, Dientamoeba fragilis и Escherichia coli. Entamoeba histolytica дает обильный рост. По сравнению с ними другие кишечные амебы не дают хорошего роста (3).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,1%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет темно-янтарныу окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется скошенный гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,3% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики штаммов через 68-72 ч при 30°С.
Штаммы микроорганизмов | Рост |
|---|---|
Entamoeba histolytica | Обильный |
Entamoeba invadens | Обильный |
Ссылки:
1. Cleveland and Sanders, 1930, Arch. Protiskenkunde, 70:223.
2. Cleveland and Collier, 1930, Am. J. Hyg., 12:606.
3. Sixth Annual Year Book, 1935-36, P. 130, Suppl., Am. J. Pub. Health, 1936, 26, No. 3.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.