Tryptose Blood Agar Base / with Yeast Extract Основа триптозного кровяного агара / То же с дрожжевым экстрактом

М097 / М450

Эти среды рекомендуют для выделения прихотливых микроорганизмов и определения гемолиза.

Состав**:

Ингредиенты	М097 грамм/литр	М450 грамм/литр
Триптоза	10,00	10,00
Мясной экстракт	3,00	3,00
Дрожжевой экстракт	–	1,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Агар-агар	15,00	15,00
Конечное значение рН (при 25°С)	7,2 ± 0,2	7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 33,0 г порошка М097 или 34,0 г порошка М450 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для получения кровяного агара остудить до 45-50°С и асептично добавить (до 7% об/об) стерильной дефибринированной крови. Тщательно перемешать, не допуская образования пузырьков, и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда готовится в соответствии с прописью Казмена (1, 2) и рекомендациями АРНА (3). Ее можно использовать в качестве основы для приготовления кровяного агара для культивирования многих прихотливых бактерий и для определения гемолиза. В оригинальной прописи имеется глюкоза, но в данной прописи она отсутствует, так как глюкоза оказывает влияние на гемолитические реакции (2).

Триптоза, мясной и дрожжевой экстракты служат источником азотистых питательных веществ, витаминов группы В, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. На кровяном агаре можно получать четкий гемолиз. Состав среды М450 способствует росту менингококков и пневмококков. Вместе с тем, среду можно использовать и без внесения крови. Выделенные культуры подвергают дальнейшей идентификации.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, слегка опалесцирует. После добавления дефибринированной крови (до 7%, об/об) среда становится вишнево-красного цвета, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор М097 (3,3% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2, а водный раствор М450 (3,4% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2 .

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С (на среде М097).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост на среде без крови	Рост на среде с кровью	Характер гемолиза
Neisseria meningitidis (13090)	Хороший или обильный	Обильный	Отсутствует
Staphylococcus aureus (25923)	Хороший или обильный	Обильный	Бета/гамма
Staphylococcus epidermidis (12228)	Хороший или обильный	Обильный	Гамма
Streptococcus pneumoniae (6303)	Средний или хороший	Хороший	Альфа
Streptococcus pyogenes (19615)	Средний или хороший	Хороший	Бета

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С (на среде М450).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост на среде без крови	Рост на среде с кровью	Характер гемолиза
Neisseria meningitidis (13090)	Обильный	Обильный	Отсутствует
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный	Обильный	Бета
Staphylococcus epidermidis (12228)	Обильный	Обильный	Гамма
Streptococcus pneumoniae (6303)	Обильный	Обильный	Альфа
Streptococcus pyogenes (19615)	Обильный	Обильный	Бета

Ссылки:

1. Casman E.P., 1942, J. Bacteriol., 43:33.
2. Casman E.P., 1947, Am. J. Clin. Path., 17 : 281.
3. American Public Health Association, 1970, Diagnostic Procedures and Reagents, 5th ed. APHA Inc., New York.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.