Основа бульона TB / без Твина 80
TB Broth Base / without Tween 80 | M100/M034 |
Основа среды ТВ с Твин 80 используется для культивирования M.tuberculosis.
Состав**:
Ингредиенты | M100 грамм/литр | M034 грамм/литр |
|---|---|---|
Протеозопептон | 4,00 | 4,00 |
Дрожжевой экстракт | 2,00 | 2,00 |
Натрия гидрофосфат | 2,50 | 2,50 |
Калия дигидрофосфат | 1,00 | 1,00 |
Натрия цитрат | 1,50 | 1,50 |
Магния сульфат | 0,60 | 0,60 |
Твин 80 | 0,50 | – |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 | ||
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 12,1 г среды М100 или 11,6 г среды М034 в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 мл глицерина (если это необходимо). Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210С) в течении 15 мин. Остудить до 450С и добавить глюкозу до конечной концентрации 0,5% и альбумин (фракция 5) или сыворотку.
Принцип и оценка результата:
Среды ТВ основаны на прописи Дюбо и Дэвиса (1) и используются в качестве жидких сред для культивирования M.tuberculosis. Эти среды поддерживают ДИФФУЗНЫЙ рост туберкулезных бацилл, поэтому могут использоваться для приготовления любых суспензий микобактерий. Среды могут быть использованы без добавок, однако добавление глюкозы и сыворотки повышает ее питательные свойства.
Протеозный пептон и дрожжевой экстракт содержат такие питательные вещества, как аминокислоты, пептиды, витамины группы В и другие.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Прозрачный раствор желтого цвета без осадка.
Кислотность среды:
При 250С водный раствор среды M100 (1,21% вес/об) или среды M034 (1,16% вес/об) имеет pH 7,0+0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
M.tuberculоsis H37 Rv (25618) | Обильный |
M.smegmatis (14468) | Обильный |
M.kansasi (12478) | Обильный |
Ссылки:
1.Dubos and Davis, 1946, J. Exp. Med., 83:409.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.