Основа анаэробного агара CNA
Anaerobic CNA Agar Base Основа анаэробного агара CNA | M1034 |
Анаэробный агар CNA используют для селективного выделения стрептококков.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
Гидролизат казеина | 12,00 |
Пептический перевар животной ткани | 5,00 |
Дрожжевой экстракт | 3,00 |
Мясной экстракт | 3,00 |
Крахмал кукурузный | 1,00 |
Глюкоза | 1,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Дитиотрейтол (DTE) | 0,10 |
L-цистеина гидрохлорид | 0,50 |
Витамин К1 | 0,01 |
Гемин | 0,01 |
Колистин | 0,01 |
Налидиксовая кислота | 0,01 |
Агар-агар | 13,5 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 44,14 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить по 100 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Остудить до температуры около 50ºС, асептично добавить в каждые 100 мл среды по 5 мл крови. Тщательно перемешать и разлить в чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Ellner и соавт. (1) разработали агар Columbia – кровяной агар для быстрого и обильного роста прихотливых микроорганизмов. Затем, для придания среде селективных свойств, они ввели в ее состав колистин (С) и налидиксовую кислоту (NA), что позволило выращивать на ней стафилококки и гемолитические стрептококки (в присутствии крови). Анаэробный агар CNA является модификацией агара Columbia CNA (2).
Пептический перевар животной ткани, гидролизат казеина, мясной экстракт служат источниками питательных веществ, дрожжевой экстракт – витаминов, глюкоза и крахмал – энергии. Колистин и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных микроорганизмов, разрушая клеточную мембрану и блокируя репликацию микробной ДНК, соответственно (3). Дитиотрейтол и цистеин обеспечивают поддержание анаэробиоза. Гемин и витамин К1 являются факторами роста анаэробных бактерий.
Перед использованием чашки с анаэробным агаром CNA рекомендуется выдержать в течение 18-24 ч в анаэробных условиях. Инкубирование засеянной среды ведут в течение 48 ч при 35ºС в анаэробных условиях. При отсутствии роста продолжают инкубирование до 7 суток, после чего выдают отрицательный ответ.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-7 дней при 35ºС в анаэробных условиях.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
Peptostreptococcus anaerobius (27337) | Хороший |
Escherichia coli (25922) | Слабый или отсутствует |
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +8ºС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.