Urea Broth Base Основа уреазного бульона

M111 / M111A

Этот бульон рекомендуют для идентификации бактерий по разложению мочевины, особенно для дифференциации сальмонелл и шигелл от протеев.

Состав**:

Ингредиенты	М111 грамм/литр	М111А грамм/литр
Калия дигидрофосфат	9,10	9,10
Калия гидрофосфат	9,50	9,50
Дрожжевой экстракт	0,10	0,10
Феноловый красный	0,01	0,01
Мочевина	–	20,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 18,7 г порошка М111 в 950 мл дистиллированной воды. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 55°С и асептично добавить 50 мл 40%-ной мочевины (FD048). Тщательно перемешать и разлить по 10 мл в стерильные пробирки для тестирования. Размешать 38,7 г порошка М111А в 950 мл дистиллированной воды. Стерилизовать фильтрованием. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Разлить среду в стерильные пробирки.

Принцип и оценка результата:

Среда разработана Rustigian и Stuart (1) и особенно рекомендуется для дифференциации сальмонелл и шигелл от протеев по уреазной активности (3, 4) в ходе диагностики кишечных инфекций (2). Грамотрицательные кишечные бактерии не могут утилизировать мочевину ввиду отсутствия питательных веществ и высокой буферности среды. При инкубировании среда становится щелочной в результате освобождения аммиака, на что указывает ее красный цвет. Все уреазные среды основаны на щелочении, но оно не является специфичным для уреазного теста. Утилизация пептонов при избытке аминокислот тоже может вызывать щелочение среды, приводя к ложноположительному результату теста на уреазу.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий оранжевый порошок.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет желто-оранжевый цвет, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С раствор основы (1,87 г М111 в 95 мл дистиллированной воды) имеет рН 6,8 ± 0,2. Водный раствор среды М111А (3,87% вес/об) при той же температуре имеет рН 6,8 ± 0,2,.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Мочевина
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	–
Escherichia coli (25922)	Обильный	–
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный	+
Proteus vulgaris (13315)	Обильный	+
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	–

Примечание:
"+" - положительная реакция (светло-вишневый цвет);
"–" - отрицательная реакция (среда без изменения).

Ссылки:

1. Rustigian and Stuart, 1941, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 47:108.
2. Finegold and Baron, 1986, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology, 7th ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.
3. Christensen, 1946, J. Bact., 52:461.
4. MacFaddin J., 1980, Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria, 2nd ed., Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С (М111) или при +8°С (М111А). Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.