Среда Раппапорта-Василиадиса
Modified Rappaport Vassiliadis Medium | M1137 / M1137I |
Среды рекомендуют для селективного обогащения и выделения сальмонелл из пищевых продуктов и других объектов внешней среды.
Состав**:
Ингредиенты | М1137 грамм/литр | М1137I грамм/литр |
|---|---|---|
Гидролизат казеина | – | 5,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 | – |
Натрия хлорид | 8,00 | 8,00 |
Калия дигидрофосфат | 1,60 | 1,60 |
Магния хлорид (х 6 Н2О) | 40,00 | 40,00 |
Малахитовый зеленый | 0,04 | 0,04 |
Конечное значение рН (при 25°С) 5,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 30,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Первоначально предложенная Раппопортом и соавторами среда (1) затем была модифицирована Василиадисом и соавт. (2), которые снизили концентрацию малахитового зеленого и повысили температуру инкубирования до 43°С. Эту среду рекомендуют для селективного обогащения и выделения сальмонелл из пищевых продуктов и других объектов внешней среды. Специалисты международного комитета (ISO) рекомендовали для определения сальмонелл среду гидролизатом казеина (3). Установлено, что гидролизат казеина стимулирует рост сальмонелл.
Исследуемый материал вносят в Забуференную пептонную воду (М614) и инкубируют при 35°С в течение 16-20 ч. Затем обогащенный материал пересевают на модифицированную среду Раппопорта-Васидиадиса и инкубируют 24-48 ч при 42±1°С, после чего материалом засевают Агар с бриллиантовым зеленым (М016).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет синюю окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы (3,0% вес/об) имеют рН 5,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при …
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост при 37°С | Рост при 42±1°С |
|---|---|---|
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | Обильный |
Salmonella paratyphi B | Хороший | Хороший |
Salmonellatyphi (6539) | Средний или хороший | Средний |
Escherichia coli (25922) | Средний | Слабый |
Ссылки:
1. Rappaport F., Konforti N. and Navon B., 1956, J. Clin. Path., 9:261.
2. Vassiliadis P. et al, 1976a, Annales de Microbiologie (Institut Pasteur), 127B : 195.
3. International Organization for Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 6579.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.