Дезоксихолатный агар Лейфсона
Leifson’s Deoxycholate Agar, Modified | M1138 |
Эту среду рекомендуют для селективного выделения и дифференциации сальмонелл и шигелл.
Состав**:
Ингредиенты | грамм /литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 5,00 |
Мясной экстракт | 5,00 |
Лактоза | 10,00 |
Натрия цитрат | 5,00 |
Железа цитрат | 1,00 |
Натрия дезоксихолат | 2,50 |
Натрия тиосульфат | 5,00 |
Нейтральный красный | 0,025 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 48,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. НЕ СТЕРИЛИЗОВАТЬ И НЕ ПЕРЕПЛАВЛЯТЬ СРЕДУ. Перегревание вредит данной среде.
Принцип и оценка результата:
Эту среду вначале описал Leifson (1), затем она была модифицирована Hynes (2) для селективного выделения и дифференциации сальмонелл и шигелл.
Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт служат источником необходимых азотистых питательных веществ для роста бактерий. Цитрат и дезоксихолат натрия подавляют рост всех грамположительных и колиформных бактерий, не влияя на рост других грамотрицательных бактерий. Лактоза позволяет дифференцировать рост ферментирующих, например, Escherichia coli, от не ферментирующих лактозу бактерий (например, сальмонелл, протеев и шигелл). Первые растут, образуя розово-красные колонии ввиду реакции индикатора нейтрального красного на кислые продукты ферментации лактозы. Вторые образуют бесцветные колонии. Цитрат железа и тиосульфат натрия позволяют определить продукцию сероводорода.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий розовато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет красновато-оранжевую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,85% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 28-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Salmonella typhi (6539) | Обильный | Бесцветные или бурые |
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | Бесцветные или бурые |
Salmonella enteritidis (13076) | Обильный | Имеют черный центр |
Shigella sonnei (25931) | Обильный | Бесцветные или розовые |
Escherichia coli (25922) | Слабый или отсутствует | Розовые с зоной преципитата |
Enterococcus faecalis (29212) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Leifson E., 1935, J. Pathol. Bacteriol., 40:581.
2. Hynes M., 1942, J. Pathol. Bacteriol., 40:581.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.