Listeria Oxford Medium Base
Основа Оксфордской среды для листерий |
M1145
|
Этот бульон со специальной добавкой рекомендуют для селективного выделения видов Listeria из патологического материала.
Ингредиенты
|
грамм /литр
|
Пептон специальный
|
23,00
|
Лития хлорид
|
15,00
|
Натрия хлорид
|
15,00
|
Крахмал кукурузный
|
1,00
|
Эскулин
|
1,00
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,50
|
Агар-агар
|
10,00
|
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 27.75 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 500С и асептически добавить растворенное в 50%-м этаноле содержимое флакона с селективной добавкой для выделения листерий (FD071). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.
Данная среда основана на прописи, предложенной Curtis и соавт. (1) для выделения Listeria monocytogenes из клинических образцов и образцов пищевых продуктов.
Хлорид лития и антибиотики подавляют рост грамотрицательной микрофлоры и подавляющей части грамположительной флоры (отдельные штаммы Staphylococcus образуют эскулинотрицательные колонии). Listeria monocytogenes гидролизует эскулин на эскулетин и глюкозу. Реагируя с цитратом железа, эскулетин образует коричнево-черный комплекс, что приводит к потемнению среды вокруг колоний.
Методика выделения листерий зависит от вида исследуемого материала (2). Для всех образцов рекомендуется селективное и холодовое обогащение (3, 4). Фекалии и другие биоматериалы гомогенизируют в 0,1% пептонной воде (M028) и 0,1 мл полученной взвеси высевают на Оксфордский агар или в бульон для селективного обогащения листерий, инкубируют при 300С в течение 7 дней, после чего высевают на селективную среду.
Для образцов пищевых продуктов и проб из внешней среды обычно используют селективное обогащение.
Гомогенный сыпучий темно-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0 % агаровому гелю.
Готовая среда имеет темно-янтарную окраску, с голубым отблеском.
При 25°С водный раствор (5,55 % вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35 °С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
Гидролиз эскулина
|
Listeria monocytogenes (19117)
|
Обильный
|
+
|
Listeria monocytogenes (19111)
|
Обильный
|
+
|
Listeria monocytogenes (19112)
|
Обильный
|
+
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Хороший
|
—
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Подавляется
|
—
|
Enterococcus hirae (10541)
|
Подавляется
|
—
|
Bacillus subtilis (6633)
|
Подавляется
|
—
|
1.Curtis G.D.W. et al, 1980, Letters in Appl. Microbiol.,8:95.
2.Van Netten P.et al,1989, Int. J. Food. Microbiol. 6:187.
3.Hayes P.S.,et al, 1986, Appl. Environ. Microbiol.,51:438.
4.Garayzabal J.F. et al 1986, Can. J. Vicrobiol.,32:149.
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.