Лактозный бульон для исследования воды
PA Broth | M1186 |
Эту среду используют для определения колиформных бактерий в питьевой воде после водоподготовки и из распределительной сети.
Состав**:
Ингредиенты | грамм /литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 5,00 |
Триптоза | 9,83 |
Мясной экстракт | 3,00 |
Лактоза | 7,46 |
Натрия хлорид | 2,46 |
Калия гидрофосфат | 1,35 |
Калия дигидрофосфат | 1,35 |
Натрия лаурилсульфат | 0,05 |
Бромкрезоловый пурпурный | 0,0085 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 30,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды (при необходимости приготовления среды тройной концентрации размешать 91,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды). Разлить по 50 мл в пробирки с завинчивающимися крышками. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Для бактериологического исследования питьевой воды, которая не должна иметь контаминирующих микроорганизмов, Weiss и Hunter (1) предложили простую методику. Позже был разработан тест РА («присутствие-отсутствие»), в соответствии с которым колиформные и другие контаминирующие микроорганизмы не должны обнаруживаться в 100 мл питьевой воды (2). Этот тест изучался в различных аспектах (3) и получил статус стандарта (4): образец питьевой воды объемом 100 мл не должен содержать каких-либо колиформных микроорганизмов.
Пептический перевар животной ткани, триптоза и мясной экстракт обеспечивают присутствие в среде азотистых питательных веществ и микроэлементов, необходимых для роста колиформных бактерий. Лактоза является ферментируемым углеводом и источником энергии. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды. Лаурилсульфат подавляет рост многих бактерий, не относимых к колиформным. Бромкрезоловый пурпурный является индикатором рН, который в кислой среде становится желтым.
Тест РА служит лишь для предварительного определения колиформных бактерий. Для подтверждения результатов используют такие среды, как Желчный бульон с бриллиантовым зеленым (М121).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет лиловую окраску, прозрачна без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,05% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет среды |
|---|---|---|
Escherichia coli (25922) | Хороший или обильный | Желтый |
Enterobacter aerogenes (13048) | Хороший или обильный | Светло-желтый |
Klebsiella pneumoniae (13883) | Хороший или обильный | Желтый |
Salmonella typhimurium (14028) | Хороший или обильный | Без изменений |
Enterococcus faecalis (29212) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Weiss and Hunter, 1939, J. Am. Water Works Assoc., 31 : 707.
2. Clark, 1969, Can. J. Microbiol., 5 : 771.
3. Clark, Burger and Sabatinos, 1982, Can. J. Microbiol., 28 : 1002.
4. Greenberg A. E., Trussell R. R. and Clesceri L. S. (Eds.), 1985, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 16th ed., APHA, Washington, D.C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.