Pseudomonas Agar (For Fluorescein) Агар для определения флюоресцеина псевдомонад

M120

Этот агар рекомендуют для определения продукции псевдомонадами флюоресцеина.

Состав**:

Ингредиенты	грамм /литр
Гидролизат казеина	10,00
Протеозопептон	10,00
Калия гидрофосфат	1,50
Магния сульфат	1,50
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 38,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15мин.

Принцип и оценка результата:

Этот агар первоначально описан Кингом и соавт. (1), а в дальнейшем был модифицирован и рекомендован американским фармакопейным комитетом (2) для определения продукции псевдомонадами флюоресцеина – флюоресцирующего водорастворимого пигмента, не растворимого в хлороформе (3). На среде стимулируется выработка флюоресцеина и подавляется образование пиоцианина. Флюоресцеин диффундирует в среду, обусловливая желтую флюоресценцию вокруг колоний псевдомонад. У некоторых штаммов вырабатывается небольшое количество пигмента, поэтому свечение желто-зеленое.

Гидролизат казеина и протеозопептон служат источником азотистых питательных веществ, углерода, серы и микроэлементов для роста псевдомонад. Фосфат обеспечивает буферные свойства среды, а сульфат магния необходим для активации выработки флюоресцеина. Концентрация соли свыше 2% влияет на выработку пигмента. Так как ультрафиолет может проявить бактерицидные свойства, прежде чем помещать культуру под УФО, необходимо получить хороший рост (3).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (3,8% вес/об в присутствии 1% глицерина) имеет рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет среды
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Обильный	Зеленовато-желтый
Pseudomonas aeruginosa (17934)	Обильный

Ссылки:

1. King, Ward and Raney, 1954, J.Lab. Clin. Med., 44 : 301.
2. United States Pharmacopeia, 1985, 21st rev., United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.