Среда для энтеротоксигенных эшерихий
Colonisation Medium w/Dulbecco’s Phosphate Buffer | M1239 |
Этот бульон используют для приготовления суспензии энтеротоксигенных Escherichia coli, используемой в тесте колонизации культуры ткани НeLa.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Панкреатический перевар желатина | 0,20 |
Пептический перевар животной ткани | 0,08 |
Настой мозга и сердца, сухой | 0,08 |
Манноза | 1,00 |
Глюкоза | 0,04 |
Натрия хлорид | 5,67 |
Натрия гидрофосфат | 0,17 |
Смесь желчных кислот | 0,10 |
Калия хлорид | 0,14 |
Калия дигидрофосфат | 0,14 |
Кальция хлорид | 0,07 |
Марганца хлорид | 0,07 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 7,76 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать. Стерилизовать фильтрованием через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Асептично разлить в стерильные пробирки или флаконы.
Принцип и оценка результата:
Эта среда рекомендована специалистами АРНА (1) для приготовления суспензии энтеротоксигенных Escherichia coli, используемой в тесте колонизации культуры ткани НeLa. Энтеротоксигенные штаммы Escherichia coli способны прилипать к эпителиоцитам тонкого кишечника, пролиферировать (колонизировать) и вырабатывать один или несколько токсинов. Специфичность взаимодействия с клетками хозяина обусловлена наличием уникальных факторов колонизации (антигенов и лектинов). Для простоты оценки колонизации предложено использовать несколько типов клеток млекопитающих, в т.ч. линию HeLa.
Панкреатический перевар желатина, пептический перевар животной ткани и настой мозга и сердца являются источником необходимых нутриентов для роста энтеротоксигенных Escherichia coli, например, аминокислот, факторов роста, микроэлементов. Манноза и глюкоза служат источником энергии, фосфат обеспечивает буферные свойства среды.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (7,76% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики штамма через 18-24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов | Рост |
|---|---|
Escherichia coli (25922) | Обильный |
Ссылки:
1. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.)., 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить не рекомедуется.