HiCrome ECC Selective Agar Base Основа хромогенного селективного агара ЕСС

M1294

HiCrome ECC Selective Agar рекомендуется для обнаружения Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых продуктах и пробах воды.

 

Рост на среде HiCrome ECC Selective Agar Base (M1294)
Escherichia coli 0157:H7 и Escherichia coli 

 

Состав*:

Ингредиенты	грамм/литр
Пептон специальный	6,00
Ферментативный гидролизат казеина	3,30
Натрия дигидрофосфат	0,60
Натрия гидрофосфат	1,00
Натрия хлорид	2,00
Натрия пируват	1,00
L-Триптофан	1,00
Сорбит	1,00
Тергитол 7	0,15
Хромогенная смесь	0,43
Агар-агар	10,00

Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0.2
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 26,48 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прогреть среду в кипящей водяной бане или в струе пара при постоянном перемешивании до полного растворения частиц (приблизительно 35 минут). НЕ АВТОКЛАВИРУЙТЕ И НЕ ПЕРЕГРЕВАЙТЕ СРЕДУ! Для придания дополнительной селективности (по желанию) в остуженную стерильную среду можно асептически внести содержимое 1 пузырька с добавкой HiCrome ECC Selective Supplement (FD190). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри. Она может быть слегка мутноватой, но это не влияет на качество среды.

Принцип и оценка результата:

HiCrome ECC Selective Agar является селективной средой, рекомендуемой для одновременного обнаружения Escherichia coli и других колиформных бактерий в пробах пищевых продуктов и воды.

Пептон специальный, ферментативный гидролизат казеина, пируват натрия и сорбит удовлетворяют потребности бактерий в азоте, ферментируемых углеводах и других необходимых факторах роста. Фосфаты придают среде буферные свойства. Состав среды обеспечивает быстрый рост даже поврежденных бактерий. Тергитол подавляет рост грамположительных и грамотрицательных бактерий, не относимых к колиформным.

Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата: Salmon-GAL и X-глюкуронид. Микробная β-D-галактозидаза расщепляет Salmon-Gal, что приводит к окрашиванию колоний колиформных бактерий в оранжево-красный цвет. Вырабатываемая кишечной палочкой β-D-глюкуронидаза расщепляет X-глюкуронид. E.coli образует колонии, окрашенные в темно-синий (до фиолетового) цвет из-за одновременного расщепления Salmon-GAL и X-глюкуронида. Добавление L-триптофана улучшает продукцию индола. Добавление цефсулодина (FD190) приводит к подавлению роста аэромонад и псевдомонад.

Исследуемый материал засевают либо на поверхность разлитой в чашки Петри среды, либо вносят в среду непосредственно перед ее розливом. Можно использовать также методику культивирования на мембранных фильтрах. На выросшие темно-синие (фиолетовые) колонии (предположительно, E. coli) наносят реагент Ковача. Развитие вишнево-красного окрашивания подтверждает их принадлежность к E.coli.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.

Плотность готовой среды:

По плотности соответствует 1,0 % агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель, окрашенный в оранжево-розоватый цвет.

Кислотность:

При 25°С 2,65 %-й (вес/об) водный раствор имеет рН 6,8 ± 0.2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (ATCC)	Цвет колоний	Salmon-GAL	X-глюкуронид	Индол
Escherichia coli (25922)	Синие с темно-синим центром	+	+	+
Escherichia coli O157:H7	Темно-синий центр и бесцветная периферия	+	-	+
Citrobacter freundii (8090)	От оранжевого до красного	+	-	-
Enterobacter aerogenes (13048)	Бесцветные	-	-	-
Salmonellaсеровар Enteritidis (13076)	Розоватые	-	-	-
Shigella flexneri (12022)	От бесцветных до розоватых	+	-	-
Enterococcus faecalis (29212)	Рост отсутствует	-	-	-

Ссылки:

1. Frampton E.W., Restaino L. and Blaszko N. 1988, J. Food Prot., 51:402.  
2. Kilian M. and Bulow P. 1976, Acta Pathol. Microbiol. Scand., Sect.B, 84:245.  
3. Le Minor L. and Hamida F. 1962, Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102:267.  
4. Manafi M. and Kneifl W. 1989, Zentralbl. Hyg., 189:225.

Условия и сроки хранения:

Хранить порошок при температуре ниже 8°С в плотно закрытой таре.

Использовать до даты, указанной на этикетке.