|
|
Всего посетителей: 3847802
|
|
|
Основа бульона Фрейзера
Этот бульон рекомендуется комитетом ISO для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление:Размешать 54,92 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210C) 15 минут. Остудить до 45-50°С и асептически добавить: для получения 1000 мл среды первичного обогащения - растворенное содержимое 1 флакончика с селективной добавкой Фрейзера (FD125I) и 2 флакончиков с добавкой Фрейзера (FD141); для получения 500 мл среды вторичного обогащения - по одному флакончику каждой добавки. Тщательно перемешать и разлить в стерильную посуду. Примечание: Хлорид лития ядовит. Избегать контакта и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно обильно промыть ее водой. Принцип и оценка результата:Данная среда готовится по прописи Fraser и Sperber (1) с небольшой модификацией. Она рекомендована международным комитетом (ISO) для первичного и вторичного обогащения, выделения и подсчета Listeria monocytogenes в пищевых продуктах и кормах для животных. Различия состоят лишь в используемых добавках. Пептон, гидролизат казеина, мясной и дрожжевой экстракты используются в качестве источника углерода, азота, витаминов и минеральных веществ, хлорид лития подавляет рост энтерококков. Налидиксовая кислота акрифлавин повышают селективность среды, подавляя рост грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. Листерии гидролизуют эскулин до глюкозы и эскулетина, который, реагируя с цитратом аммонийного железа, образует комплексное соединение, окрашивающее среду в темно-коричневый или черный цвет. Пробы засевают в среду первичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 2 флакончиков добавки FD141 на 1000 мл среды) и инкубируют 24 ч при 30°C. Затем 0,1 мл культуральной жидкости переносят в среду вторичного обогащения (с содержимым 1 флакончика добавки FD125I и 1 флакончика добавки FD141 на 500 мл среды) и инкубируют 48 ч при 35-37°C. После обогащения культуры высевают на оксфордский агар и/или среду PALCAM для выделения и подсчета листерий. Контроль качества:Внешний вид порошка:Гомогенный сыпучий желтый порошок. Цвет и прозрачность готовой среды:Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна. После внесения добавок раствор дает флюоресценцию и может содержать легкий преципитат. Кислотность среды:При 25°С водный раствор (5,49% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2. Культуральные свойства:Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С .
Примечание: * почернение среды Ссылки:1.Fraser J.A. and Sperber W.H., 1988, Food Protect., 51(10):762. Условия и сроки хранения:Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.
|