Углеводная основа для классификации дрожжей
Yeast Carbon Base | M141 |
Эту среду рекомендуют для классификации дрожжевых грибов по способности ассимилировать соединения азота.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Глюкоза | 10,00 |
L-Гистидина гидрохлорид | 0,001 |
DL-Метионин | 0,002 |
DL-Триптофан | 0,002 |
Биотин | 0,000002 |
Кальция пантотенат | 0,0004 |
Фолиевая кислота | 0,000002 |
Инозит | 0,002 |
Кислота никотиновая | 0,0004 |
П-Аминобензойная кислота (ПАБК) | 0,0002 |
Пиридоксина гидрохлорид | 0,0004 |
Рибофлавин | 0,0002 |
Тиамина гидрохлорид | 0,0004 |
Кислота борная | 0,0005 |
Меди сульфат | 0,00004 |
Калия иодид | 0,0001 |
Железа хлорид | 0,0002 |
Марганца сульфат | 0,0004 |
Натрия молибдат | 0,0002 |
Цинка сульфат | 0,0004 |
Калия дигидрофосфат | 1,00 |
Магния сульфат | 0,50 |
Натрия хлорид | 0,10 |
Кальция хлорид | 0,10 |
Конечное значение рН (при 25°С) 5,5 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
А: Для теста на ассимиляцию соединений азота приготовить бульон 10-кратной концентрации. Размешать 11,7 г порошка в 100 мл дистиллированной воды. Добавить стерильный раствор соответствующего азотсодержащего соединения. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Стерилизовать фильтрованием.
Б: Для определения дрожжевых грибов (кроме Saccharomyces cerevisiae) размешать 2,35 г порошка в 100 мл дистиллированной воды.
В: Для определения и подсчета диких штаммов дрожжевых грибов в пиве и сопутствующих материалах добавить 0,33 г сульфата аммония и 4,0 г агар-агара к основе. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Эта среда разработана Wickerham (1, 2) и рекомендована для классификации дрожжевых грибов по способности ассимилировать соединения азота. С этой целью к основе добавляют различные источники азота: сульфат аммония (1,0 г), мочевину (0,46 г), нитрат калия (0,78 г), аспарагин (1,0 г) или пептон (желатин, 1, 32 г).
Эта синтетическая среда содержит источники углерода, аминокислоты, витамины и минералы, необходимые для роста дрожжевых грибов. Как установлено Wickerham, некоторые дрожжевые грибы могут усваивать соединения азота только в присутствии витаминов.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий белый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда бесцветна, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (1,17% вес/об) имеет рН 5,5 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 6-7 дней (или более) при 25-30°С
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост на основе | Рост на основе с сульфатом аммония |
|---|---|---|
Saccharomyces cerevisiae (9763) | Слабый или отсутствует | Хороший |
Sacharomyces uvarum (9080) | Слабый или отсутствует | Хороший |
Ссылки:
1. Wickerham, 1946, J. Bact., 52:293.
2. Wickerham, 1951, U.S. Dept. Agric. Tech. Bull. No. 1029.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.