Основа хромогенного агара для листерий, модифицированная
HiCrome Listeria Agar Base, ModifiedОснова хромогенного агара для листерий, модифицированная | M1417 |
Эта селективная и дифференциальная среда рекомендуется для быстрого прямого обнаружения листерий, в частности, Listeria monocytogenes.
L. ivanovii L. monocytogenes |
Состав*:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептон специальный | 23,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Дрожжевой экстракт | 1,00 |
Солодовый экстракт | 5,00 |
Лития хлорид | 5,00 |
Рамноза | 10,00 |
Феноловый красный | 0,12 |
Хромогенная смесь | 5,13 |
Агар-агар | 13,00 |
Конечное значение рН (при 250С) 7,3 ± 0.2
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 33,62 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Осторожно прокипятить до полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (1210С) в течение 15 мин. Остудить до 50 °С и асептически внести растворенное содержимое 1 флакончика со специальной добавкой (FD181).
Предупреждение: Хлорид лития ядовит. Избегайте контакта с ним или вдыхания его паров. При попадании на кожу немедленно промыть ее большим количеством воды.
Принцип и оценка результата:
Данный агар является модификацией среды, первоначально был предложен (1, 2) для определения листерий в пищевых материалах. Хромогенный агар позволяет расти только листериям, а L. monocytogenes можно непосредственно идентифицировать через 24-48 ч после предварительного обогащения материала. Пропись данной среды основана на одновременном определении ферментации рамнозы и хромогенном определении фосфолипазы С, продуцируемой L. monocytogenes и Listeria ivanovii (1, 2). Колонии у L. ivanovii – голубые без желтого ореола (рамнозоотрицательные), а у L. monocytogenes и Listeria innocula - голубые с желтым ореолом (рамнозоположительные).
Пептон, дрожжевой и солодовый экстракт являются источниками азотистых веществ, витаминов группы В и других важнейших питательных веществ. Рамноза является ферментируемым субстратом, а феноловый красный – индикатором рН. Хлорид натрия обеспечивает изотоничность среды. Хлорид лития и вносимая добавка (FD181) подавляют рост большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжевых и плесневых грибов.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный порошок светло-розового цвета.
Плотность готовой среды:
По плотности соответствует 1,3 % агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
Кислотность среды:
При 250С 6,72 %-й (вес/об) водный раствор имеет рН 7,3 ± 0.2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (ATCC) | Рост | Ферментация рамнозы | Цвет колоний |
|---|---|---|---|
L. monocytogenes (19118) | Обильный | + (желтый ореол) | Синие |
L. ivanovii (19119) | Обильный | - | Синие |
L. innocula (33090) | Обильный | + (желтый ореол) | Синие |
Примечание: "+" положительная реакция; "-" отрицательная реакция
Ссылки:
1. Notermans S. H. and Dufrenne J., (1991), J. Appl. Environ. Microbiol., 57 (09):2666-70.
2. Mengaud J., Braun-Breton C. and Cossart P., (1991), Mol. Microbiol., 5 (2): 367-372.
Условия и сроки хранения:
Хранить порошок при температуре ниже 80С в плотно закрытой таре.
Использовать до даты, указанной на этикетке.
L. monocytogenes