Основа колумбийского бульона
Columbia Broth Base | М145 |
Эта среда является средой общего назначения и используется также для культивирования прихотливых микроорганизмов.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептон (специальный) | 10,00 |
Биопептон | 10,00 |
Настой сердца, сухой | 3,00 |
L-цистина гидрохлорид | 0,10 |
Глюкоза | 2,50 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Магния сульфат | 0,10 |
Железа сульфат | 0,02 |
Натрия карбонат | 0,60 |
Трис (гидроксиметиламинометан) | 0,83 |
Трис (гидроксиметиламинометан) гидрохлорид | 2,86 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,5 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 35,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. При необходимости можно добавить SPS (полианетол сульфонат-натрий) до конечной концентрации 0,1%. Разлить в пробирки и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Ellner и соавт.(1) разработали колумбийский кровяной агар. На его основе Morello и Ellner разработали новую жидкую среду для выделения гемокультур (2). Они отметили, что на ней раньше появляются признаки роста гемокультуры.
Среда содержит пептоны и настой сердца, которые поддерживают обильный рост микроорганизмов. Имеющийся в колумбийском агаре крахмал в состав данной среды не включен. Показано, что добавление в состав среды солей способствует выделению микроорганизмов. Бульон забуферен трисом.
Для лучшего выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов можно повысить содержание цистина. SPS добавляют во флаконы для выделения гемокультур с целью подавления активности лизоцима, комплемента, фагоцитоза и для разрушения аминогликозидных антибиотиков (3).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среды имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, может иметь легкий преципитат.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,5% вес/об) имеет рН 7,5 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Clostridium perfringens (12924) | Обильный |
Neisseria meningitidis (13090) | Обильный |
Staphylococcus aureus (25923) | Обильный |
Streptococcus pyogenes (19615) | Обильный |
Streptococcus mitis (9895) | Обильный |
Ссылки:
1. Ellner, Stoessel, Drakeford and Vasi, 1966, Am. J. Clin. Pathol., 45:68.
2. Morello and Ellner, 1969, Appl. Microbiol., 17:68.
3. Reller, Murray and MacLowry, 1982, Cumitech 1A, Blood cultures II. Coord. Ed., ASM, Washington D.C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.