Основа агара с олеиновой кислотой для микобактерий

Эту среду используют для приготовления плотной среды, предназначенной для выращивания культур Mycobacterium tuberculosis в пробирках или чашках.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 4,0 г порошка в 180 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Асептично добавить 20 мл стерильной добавки (FD020) и 5 000-10 000 ЕД пенициллина к 180 мл стерильной остуженной среды. Тщательно перемешать и разлить в стерильные пробирки или чашки.

Принцип и оценка результата:

Dubos и Middlebrook (1) описали агаровую среду для первичного выделения туберкулезной палочки и изучения морфологии ее колоний. Данная основа с добавлением альбумина и олеиновой кислоты является богатой средой для выделения туберкулезной палочки (2) и используется также для определения ее чувствительности к химиотерапевтическим препаратам.

Среда обогащена гидролизатом казеина и L-аспарагином. Широкий спектр неорганических солей является источником ионов, необходимых в метаболических процессах Mycobacterium tuberculosis. Добавляемая в среду олеиновая кислота служит источником жирных кислот для размножения микобактерий. Пенициллин подавляет рост многих бактерий. Эту среду готовят без добавления глицерина или глюкозы, чтобы не способствовать росту комменсалов.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует и дает легкий преципитат, когда в пробирках или чашках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (2,0% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 4-6 недель при 35-37°С.

Ссылки:

1. Dubos and Middlebrook, 1942, Am. Rev. Tuberculosis, 56:334.
2. Wallace and Erlich, 1950, Am. Rev. Tuberculosis, 61,563.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
4. Finegold and Baron, 1990, Bailey and Scott’s ‘Diagnostic Microbiology’ 8th ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.