Сероводородный агар
Lead Acetate Agar | M180 |
Эту среду рекомендуют для определения сероводорода, образуемого кишечными бактериями.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 15,00 |
Протеозопептон | 5,00 |
Глюкоза | 1,00 |
Свинца ацетат | 0,20 |
Натрия тиосульфат | 0,08 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 36,28 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки для тестирования. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить в наклонном положении, чтобы сформировался скос и выраженный столбик. Чистые культуры засевают штрихами по поверхности скоса и уколом в столбик среды.
Принцип и оценка результата:
Orlowski (1) отметил, что Salmonella typhi можно отличить от похожих микроорганизмов по образованию сероводорода. Jordan и Victorson (2) описали способ дифференциации Salmonella paratyphi A и Salmonella paratyphi B. Данная среда соответствует модификации, предложенной Spray и Tanner (4) и использовалась для выявления сероводорода у термофильных бактерий водного происхождения. Spray (4) использовал ее как полужидкую для культивирования и идентификации спорообразующих анаэробов (3).
Пептический перевар животной ткани, протеозопептон и глюкоза служат источником необходимых для роста бактерий питательных веществ. Ацетат свинца – индикатор сероводорода. Образование газа из глюкозы определяют по присутствию пузырьков в среде. Специальными исследованиями подтверждена нетоксичность свинца в отношении некоторых микроорганизмов (5).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,63% вес/об) имеет рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35 ± 0,2°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Образование сероводорода | Газ |
|---|---|---|---|
Enterobacter aerogenes (13048) | Обильный | – | + |
Escherichia coli (25922) | Обильный | – | + |
Salmonella typhi (6539) | Обильный | + | ± |
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | + | – |
Shigella dysenteriae (13313) | Обильный | – | – |
Shigella flexneri (12022) | Обильный | – | – |
Salmonella paratyphi A | Обильный | – | – |
Salmonella paratyphi B | Обильный | + | – |
Примечания:
Сероводород "+" - развитие коричневой окраски в среде.
Ссылки:
1. Orlowski, 1897, Dissert, St. Petersburg.
2. Jordan and Victorson, 1917, J. Infect. Dis., 21:554.
3. Morrison and Tanner, 1922, J. Bact., 7:343.
4. Spray, 1936, J. Bact., 32:135.
5. Pure Culture Study of Bacteria, 1 : NO.8, 1933.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.