Middlebrook 7H9 Broth Base
Основа бульона Миддлбрука 7H9 |
M198
|
Основа бульона Миддлбрука 7Н9 с ростовой добавкой рекомендуется для выращивания и тестирования чувствительности Mycobacterium tuberculosis.
Ингредиенты
|
грамм/
литр |
Аммония сульфат
|
0,50
|
L-Глутаминовая кислота
|
0,50
|
Калия дигидрофосфат
|
1,00
|
Натрия гидрофосфат
|
2,50
|
Натрия цитрат
|
0,10
|
Железа аммонийного цитрат
|
0,04
|
Магния сульфат
|
0,05
|
Кальция хлорид
|
0,0005
|
Цинка сульфат
|
0,001
|
Меди сульфат
|
0,001
|
Пиридоксин
|
0,001
|
Биотин
|
0,0005
|
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2
|
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Размешать 2,35 г порошка в 450 мл дистиллированной воды. Добавить 2 мл глицерина или 0,5 г Твин - 80. Нагреть до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210С) в течении 10 мин. Остудить до 450С и асептически добавить содержимое одного флакона добавки FD019 (Middlebrook ADC Growth Supplement). Хорошо перемешать.
Среда 7Н9 усовершенствована Миддлбруком с соавт. (1) для выращивания микобактерий и для исследования содержания INH в сыворотке крови больного. Среда может использоваться для приготовления посевного материала при антибактериальных исследованиях в качестве основной среды для проведения биохимических тестов и для субкультивирования музейных штаммов.
Среда 7Н9 содержит много неорганических солей, необходимых для поддержания роста микобактерий. Добавка FD019 (Middlebrook ADC Growth Supplement) содержит альбумин, глюкозу, каталазу и хлористый натрий. Некоторые свободные жирные кислоты являются токсичными по отношению к микобактериям, однако альбумин связывает такие жирные кислоты и препятствует их токсическому воздействию. Токсичные перекиси, присутствующие в среде, разрушаются каталазой. Глюкоза, как источник энергии, поддерживает рост бактерий. Хлористый натрий поддерживает осмотическое давление среды, а глицерин усиливает рост микобактерий.
Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.
Светлого янтарного цвета прозрачный раствор без осадка.
При 250С водный раствор (0,47% вес/об), содержащий глицерин или Твин-80, имеет pH 6,6+0,2.
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
|
Рост
|
M.tuberculоsis H37 Rv(25618)
|
Обильный или хороший
|
M.smegmatis(14468)
|
Обильный или хороший
|
M.fortuitum(6841)
|
Обильный или хороший
|
1. Middlebrook and Cohn, 1958, Am. J. Public Health, 48:844.
Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.