Основа бульона BAGG
B.A.G.G. Broth Base | M220 |
Данный бульон используют для селективного культивирования и обнаружения энтерококков в клиническом материале и объектах санитарно-микробиологического контроля.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Триптоза | 20,00 |
Глюкоза | 5,00 |
Калия гидрофосфат | 4,00 |
Калия дигидрофосфат | 1,50 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Натрия азид | 0,50 |
Бромкрезоловый пурпурный | 0,015 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,9 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 36,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 мл глицерина. Подогреть до полного растворения частиц и разлить в пробирки для тестирования по 10 мл. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 15 мин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Не рекомендуется стерилизовать среду при 1,1 атм (121°С). Концентрацию среды подбирают в соответствии с объемом исследуемого материала. Для небольшого инокулюма, например, фекалий, клинического материала или небольших объемов материала для профилактического исследования берут среду нормальной концентрации, а для больших объемов (вода для санитарно-микробиологического исследования и др.) необходимо готовить среду двойной концентрации.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата:
Забуференный бульон с глюкозой, глицерином, азидом натрия и индикатором бромкрезоловым пурпурным (BAGG) в первоначальной прописи разработан Hajna и Perry (1) как среда для обнаружения энтерококков. Затем Hajna (2) модифицировал ее путем введения глицерина (для повышения чувствительности среды).
Ввиду наличия фосфатов и хлорида натрия среда хорошо забуферена и имеет стабилизированное осмотическое давление. Азид натрия подавляет рост грамотрицательных бактерий. Индикатор рН бромкрезоловый пурпурный реагирует на кислые продукты разложения глюкозы изменением цвета с лилового на желтый.
Посевы клинического материала инкубируют при 35°С в течение 18-48 ч, посевы для санитарно-микробиологической оценки объектов выдерживают при 45°С в течение 24 ч.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-бежевый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет лиловую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,6% вес/об) с 0,5% глицерина имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 45°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Кислота |
|---|---|---|
Streptococcus bovis (27960) | Обильный | + |
Enterococcus faecalis (29212) | Обильный | + |
Streptococcus pyogenes (19615) | Подавляется | – |
Enterobacter aerogenes (13048) | Подавляется | – |
Escherichia coli (25922) | Подавляется | – |
Примечание:
“+” - положительный результат (вся среда становится желтой);
“–” - отрицательный результат (среда остается лиловой)
Ссылки:
1. Hajna A.A. and Perry C.A., 1943, Am. J. Public Health, 33:550.
2. Hajna A.A., 1951, Public Health Lab., 9:80.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.