Глюкозо-маннитный агар
Gillies Agar No. 1 | M241 |
Этот дифференциальный пробирочный агар используют для предварительной идентификации кишечных бактерий по способности ферментировать глюкозу, маннит и мочевину.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Полипептон | 15,00 |
Дрожжевой экстракт | 2,00 |
Глюкоза | 1,00 |
Маннит | 10,00 |
Бромтимоловый синий | 0,025 |
Крезоловый красный | 0,008 |
Тимоловый синий | 0,02 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 43,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,8 атм (115 °С) в течение 15 мин. Дать пробиркам остыть до 45 °С и асептически добавить 50 мл стерильного 20 %-го раствора мочевины. Тщательно перемешать и разлить в пробирки. Остудить в наклонном положении для формирования скоса и столбика.
Принцип и оценка результата:
Этот дифференциальный пробирочный агар используют для предварительной идентификации кишечных бактерий по способности ферментировать глюкозу, маннит и мочевину (1). На него засевают культуры предположительно относимые к сальмонеллам или шигеллам (штрихами по поверхности скоса и уколом в столбик среды). Полипептон и дрожжевой экстракт являются источниками азотистых питательных веществ и витаминов группы В, необходимых для роста кишечных бактерий. Глюкоза и маннит — ферментируемые субстраты. В среде имеются три различных индикатора (бромтимоловый синий, крезоловый красный и тимоловый синий) с различными диапазонами рН-чувствительности. Ферментация мочевины приводит к развитию темно-синего окрашивания. При ферментации глюкозы и маннита появляется желтая окраска столбика и скоса, соответственно. На образование газа указывают разрывы в среде.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-му агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда прозрачна, имеет зеленую окраску, слегка опалесцирует, когда в пробирках формируется столбик и скос геля.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,3% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Глюкоза/маннит | Уреаза |
|---|---|---|---|
Escherichia coli (25922) | Обильный | +* | – |
Salmonella серовара Typhi (6539) | Обильный | +* | – |
Enterobacter aerogenes (13048) | Обильный | +* | – |
Klebsiella pneumoniae (13883) | Обильный | +* | + |
Примечание: * желтый скос и столбик
Ссылки:
1.Gillies, 1956, J. Clin. Path., 9:368
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.