Основа среды IUT для микобактерий
IUT Medium Base | M247 |
Основа среды IUT c добавками глицерина и эмульсии яйца используется для культивирования Mycobacterium tuberculosis.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
L-Аспарагин | 3,60 |
Калия дигидрофосфат | 2,46 |
Магния сульфат | 0,24 |
Магния цитрат | 0,60 |
Малахитовый зеленый | 0,40 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 | |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 7,3 г порошка в 600 мл дистиллированной воды, содержащей 12 мл глицерина. При необходимости нагреть до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм ( 1210С ) в течение 15 мин. Охладить до 500С и асептически добавить 1 литр стерильной яичной эмульсии. Хорошо перемешать и разлить по пробиркам. Прогреть при 850С в течение 1 часа.
Принцип и оценка результата:
Эта среда рекомендована Международным союзом по борьбе с туберкулезом (International Union Against Тuberculоsis ) для диагностики микобактериальных инфекций (1). Она отличается от среды Левенштейна - Йенсена отсутствием картофельного крахмала и дает более высокий процент положительных результатов при первичных посевах (2). Среда обеспечивает более быстрый и обильный рост различных культур.
Малахитовый зеленый ингибирует рост сопутствующей флоры, а также является pH - индикатором. L-Аспарагин и неорганические соли необходимы для метаболизма микобактерий.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок пурпурно-синего цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Смесь стерильной основы и яичной эмульсии после прогревания при 850С в пробирках имеет светло-синий цвет со слегка опалесцирующей гладкой поверхностью.
Кислотность среды:
При 250С водный раствор (7,3 г в 600 мл дистиллированной воды) имеет pH 7,0+0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 4-6 недель при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
M.tuberculоsis H37 Rv (25618) | Обильный |
M.smegmatis (14468) | Обильный |
Ссылки:
1.International Tuberculоsis Year Book, 1955, Bulletin of the International Union against Tuberculоsis, p. 89.
2.La Placa, Bubani and Raspi, 1956, Riv. Pathol. Clin. Tuberc., 29:133.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.