Mycoplasma Agar / Broth Base Агар Микоплазма / Основа Бульона Микоплазма

M266 / M267 / M268

Эти среды с обогащающей добавкой используют для выделения и культивирования микоплазм (PPLO).

Состав**:

Ингредиенты	М266 грамм/литр	М267 грамм/литр	М268 грамм/литр
Настой говяжьего сердца	250,00	250,00	250,00
Пептический перевар животной ткани	10,00	10,00	10,00
Натрия хлорид	5,00	5,00	5,00
Кристаллический фиолетовый	–	–	0,01
Агар-агар	15,00	–	–
Конечное значение рН (при 25°С) 7,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 36,0 г порошка М266 или 21,0 г порошков М267 или M268 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить 1% стерильной лошадиной сыворотки (RM1239) и добавку Mycoplasma Supplement (FD075). Перед розливом среду тщательно перемешать. Для среды М268, помимо добавок RM1239 и FD075, ввести 2,85 мл 1%-ного раствора теллурита калия (FD052). Вместо лошадиной сыворотки можно использовать асцитическую жидкость.

Принцип и оценка результата:

Эти среды разработаны Morton и соавт. (1) и используются для выделения микоплазм из клинического материала (мокроты и др.), а также из смешанных культур. Компоненты среды и все добавки, используемые для культивирования микоплазм, не должны содержать токсических веществ, даже в малых количествах. Для хорошего роста многие микоплазмы нуждаются в добавлении сыворотки крови, а также присутствии антибиотика, препятствующего росту сопутствующих микроорганизмов. Кристаллический фиолетовый и теллурит калия подавляют рост многих грамположительных и грамотрицательных бактерий. Большинство видов микоплазм относятся к аэробам или факультативным анаэробам, но некоторые являются микроаэрофилами. Немногие микоплазмы являются анаэробными сапрофитами, которые лучше всего растут в диапазоне 22-35°С, патогенные штаммы – при 35°С. При росте на агаре микоплазмы образуют характерные колонии, врастающие в среду.

Чашки или пробирки со средой рекомендуется инкубировать в атмосфере 5-10% углекислого газа и учитывать результаты через 48 ч, а в случае отсутствия роста – в течение 3 недель.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М266).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М266 (3,6% вес/об), М267 или М268 (2,1% вес/об) имеют рН 7,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 35°С в атмосфере 10% углекислого газа.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Рост*
Mycoplasma bovis (25523)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Mycoplasma gallinarium (19708)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Mycoplasma pneumoniae(15531)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Streptococcus pneumoniae (6303)	Хороший или обильный	Подавляется

Примечания: * с добавками кристаллического фиолетового и теллурита калия.

Ссылки:

1. Morton, Smith and Leverman, 1951, Am. J. Syphilis Gonorrh. Veneral Diseases, 35 : 361.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.