Фенилэтаноловый агар
Phenylethyl Alcohol Agar / Phenylethanol Agar | M269 / M269A |
Агар является селективной средой, которую используют для выделения таких грамположительных микроорганизмов, как стафилококки и стрептококки.
Состав**:
Ингредиенты | М269 грамм/литр | М269A грамм/литр |
|---|---|---|
Гидролизат казеина | 10,00 | 10,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 | – |
Мясной экстракт | – | 3,00 |
Натрия хлорид | 5,00 | 5,00 |
Фенилэтиловый спирт | 2,50 | 2,50 |
Агар-агар | 15,00 | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 42,5 г порошка М269 или 35,5 г порошка М269A в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для приготовления кровяного агара в стерильную расплавленную и остуженную до 45°С среду внести дефибринированную кровь (до 5%, об/об). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Агар является селективной средой, которую используют для выделения грамположительных микроорганизмов, особенно таких, как стафилококки и стрептококки (1). Фенилэтиловый спирт оказывает бактериостатическое действие на грамотрицательные микроорганизмы, подавляя у них синтез ДНК (2). В смешанных культурах он частично подавляет рост протеев.
Гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки и мясной экстракт обеспечивают присутствие азотистых веществ, углерода, серы и микроэлементов для роста микроорганизмов. Кровь значительно обогащает среду факторами роста. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует. После добавления дефибринированной крови (до 5%, об/об) среда становится вишнево-красного цвета, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М269 (4,25% вес/об) или М269A (3,55% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост на среде с кровью | Цвет колоний |
|---|---|---|
Staphylococcus aureus (25923) | Хороший или обильный | Бело-серые или кремово-желтые |
Enterococcus faecalis (29212) | Хороший или обильный | Сине-серые |
Salmonella typhi (6539) | Средний или отсутствует | – |
Escherichia coli (25922) | Слабый или отсутствует | – |
Ссылки:
1. Lilley and Brewer, 1953, J. Am. Pharm. Assoc., 42:6.
2. Dowell, Hill and Altemeier, 1964, J. Bact., 88:1811.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.