Основа дифференцирующего бульона (с плазмой) для стафилококков
Coagulase Mannitol Broth Base | М277 |
Среду с добавкой плазмы используют для одновременного определения ферментации маннита и плазмакоагулазы при дифференциации Staphylococcus spp.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Настой сердечной мышцы | 375,00 |
Пептический перевар животной ткани | 10,00 |
Маннит | 10,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Феноловый красный | 0,025 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 35,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в соответствующую посуду и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Непосредственно перед тестированием асептично добавить до 12-15% (об/об) стерильную, предварительно проверенную, плазму. Тщательно перемешать.
Принцип и оценка результата:
Эту среду используют для одновременного определения ферментации маннита и плазмакоагулазы при дифференциации Staphylococcus spp. (1). Для идентификации микроорганизмов по ферментативным свойствам их надо выращивать на подходящих питательных средах в присутствии ферментируемого субстрата. Данная среда хорошо подходит для не только стафилококков, но и для прихотливых микроорганизмов. Ферментация маннита и коагулазная активность позволяют предварительно идентифицировать «патогенные» стафилококки (2). В случае ферментации маннита среда закисляется и первоначально красно-оранжевого цвета индикатор (феноловый красный) окрашивается в желтый цвет. Образование газа можно отмечать, поместив в пробирку небольшой поплавок.
Для тестирования берут 2-5 мл среды с плазмой, вносят 2 капли испытуемой культуры и инкубируют при 37°С, проверяя рост через 2-3 ч и после 4-5 ч инкубации. Для контроля рекомендуется параллельно инкубировать незасеянную среду.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий розовый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (3,5% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Маннит (кислота) | Коагулаза |
|---|---|---|---|
Staphylococcus aureus (25923) | Обильный | + | + |
Staphylococcus epidermidis (12228) | Обильный | – | – |
Ссылки:
1. Schaub and Merrit, 1960, Bull. Johns Hopkins Hosp., 106:25.
2. Mincheu and Cluff, 1961, J. Chron. Dis., 13:354.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.