Триптон-соевый агар / бульон
Soyabean Casein Digest Agar / Medium (Tryptone Soya agar / Broth) | M290 / M011 |
Эти среды используют в качестве основных для культивирования широкого круга микроорганизмов. Триптон-соевый бульон рекомендуют для тестов на стерильность.
Рост на среде Antibiotic Assay Medium No. 37 (M011), слева направо:
1.Streptococcus pyogenes
2.Staphylococcus aureus
3.Escherichia coli
4.Контроль
Состав**:
Ингредиенты | М290 грамм/литр | М011 грамм/литр |
|---|---|---|
Гидролизат казеина | 15,00 | 17,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 | 3,00 |
Натрия хлорид | 5,00 | 5,00 |
Калия гидрофосфат | – | 2,50 |
Глюкоза | – | 2,50 |
Агар-агар | 15,00 | – |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 40,0 г порошка М290 или 30,0 г порошка М011 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. При необходимости асептично внести в предварительно остуженную до 45-50°С среду дефибринированную кровь (до 5% об/об).
Принцип и оценка результата:
В разных фармакопеях триптон-соевый бульон рекомендуют для тестов на стерильность (1, 2). Его используют также для тестов на чувствительность к антимикробным веществам методом серийных разведений (3). Пропись Триптон-соевого агара (М290) соответствует рекомендациям американской фармакопеи (1) и используется в тестах на эффективность консервации и присутствие микроорганизмов. Эту среду можно использовать для фаготипирования, колицинотипирования, потребности видов Haemophilusв факторах X и V (4). Gunn и соавт. (5) использовали эту среду с добавлением 5% крови (об/об) для изучения гемолитических реакций. Если на основе данной среду готовят шоколадный агар, на ней хорошо растут нейссерии, Haemophilusinfluenzae и т.п.
Комбинация гидролизата казеина и папаинового перевара соевой муки придает среде питательность, т.к. они являются источником аминокислот и длинноцепочечных пептидов, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза и фосфат служат, соответственно, источником углевода и буфером, которые необходимы особенно в среде М011. Хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление в обеих средах.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М290).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель. Если в среду добавляется кровь, она становится вишнево-красной.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М290 (4,0% вес/об) или М011 (3,0% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост (без крови) | Рост (с кровью)* | Гемолиз |
|---|---|---|---|
Candida albicans (10231) | Обильный | Обильный | – |
Staphylococcusaureus (25923) | Обильный | Обильный | b |
Streptococcuspyogenes(19615) | Хороший или обильный | Обильный | b |
Bacillus subtilis (6633) | Обильный | Обильный | Отсутствует |
Bacteroidesvulgatus(8482) | Обильный | Обильный | Отсутствует |
Neisseria meningitidis (13090) | Обильный | Обильный | Отсутствует |
Примечание: рост на среде М290
Ссылки:
1. The United States Pharmacopoeia / National Formulary, 1995, 23/18, The United States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, MD.
2. Indian Pharmacopeia, 1996, Govt. of India, Ministry of Health and Family Welfare, New Delhi, India.
3. Wright and Welch, 1959-60, Antibiotics Ann., 61.
4. Blair J. E. and Carr M., 1953, S. Infect. Dis. 93:1-13.
5. Gunn. B. A. et al, 1977, J. Clin. Microbiol., 5(6) : 650.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.