Агар МакКонки с сорбитом
MacConkey Sorbitol Agar Base | M298I |
Этот агар специалисты международного комитета ISO рекомендуют (ISO/DIS 16654:1999) в качестве селективной среды для выделения Escherichia coli 0157:H7 из продуктов питания и кормов для животных.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Ферментативный гидролизат казеина | 17,00 |
Мясной пептон | 3,00 |
Сорбит | 10,00 |
Смесь желчных солей | 1,50 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Нейтральный красный | 0,03 |
Кристаллический фиолетовый | 0,001 |
Агар-агар | 13,50 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 50,0 г порошка в 990 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С и асептически добавить растворенное содержимое 2 флакончиков с цефиксим-теллуритной добавкой (FD147). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Данный агар готовят в соответствии с прописью Rappaport и Henig (1). Он рекомендуется
для выделения Escherichia coli 0157:H7, которые, как известно, не ферментируют сорбит (2) и поэтому образуют бесцветные колонии. Гидролизат казеина и мясной пептон служат источником углерода, азота и других необходимых питательных веществ для роста бактерий. Сорбит является ферментируемым субстратом. Кристаллвиолет и желчные соли подавляют рост большинства грамположительных микроорганизмов. Нейтральный красный – индикатор рН. Хлорид натрия поддерживает оптимальное осмотическое давление среды.
Zadik et al (3) использовали цефиксим и теллурит калия для повышения селективности среды МакКонки с сорбитом в отношении Escherichia coli 0157:H7. Данный уровень теллурита позволяет дифференцировать серогруппу 0157 от остальных эшерихий и подавляет рост видов Aeromonas и Providencia. Присутствующие в материале псевдомонады растут на этой среде в виде бесцветных колоний. Для их дифференциации с эшерихиями рекомендуется провести оксидазный тест, который занимает 5-10 секунд.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий розовато-бежевый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,35% агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет лиловато-красную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется пластинка геля.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 37°С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Escherichia coli (25922) | Подавляется | – |
Escherichia coli 0157:H7 | Хороший | Бесцветные |
Pseudomonas aeuroginosa (27853) | Отсутствует или слабый | – |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Rappaport F. and Henig E. (1952), J. Clin. Path. 5.361.
2. March S.B. and Ratnam S. (1986) : J. Clin. Microbiol. 23, 869-872.
3. Zadik P.M., Chapman P.A., and Siddons C.A. (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.