Основа бульона для трихомонад
Kupferberg Trichomonas Broth Base | M305 |
Эту среду с добавлением обогащающих веществ и антибиотиков используют для селективного культивирования и выделения трихомонад.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 20,00 |
Мальтоза | 1,00 |
L-цистеина гидрохлорид | 1,50 |
Метиленовый синий | 0,003 |
Агар-агар | 1,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 23,5 г порошка в 950 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50-55°С и асептично добавить 50 мл стерильной говяжьей или человеческой сыворотки крови и растворенное в воде содержимое пузырька с селективной добавкой для трихомонад (FD099) или хлорамфеникол (до концентрации 1 мг/мл). Тщательно перемешать и разлить в соответствующие емкости.
Принцип и оценка результата:
Эту среду разработали Kupferberg и соавт. (1). В ряде работ (2, 3) показано преимущество культурального метода обнаружения трихомонад, по сравнению с микроскопией клинического материала. Отрицательные результаты посевов – наилучший критерий излеченности (4). Культуральный метод считается ценным дополнением к диагностике трихомоноза (5, 6).
Гидролизат казеина служит источником азотистых питательных веществ, мальтоза – источником энергии. Стрептомицин или хлорамфеникол и пенициллин являются селективными компонентами, которые подавляют рост бактерий, не влияя на рост трихомонад.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску и некоторую вязкость, слегка опалесцирует. Верхняя часть среды (не более 10%) при стоянии окрашивается в зеленый цвет.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,35% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 72 ч (до 7 суток) при 30°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Trichomonas gallinae (30002) | Обильный |
*Trichomonas vaginalis (30001) | Обильный |
Trichomonas tenax (30207) | Обильный |
*Pentatrichomonas hominis (30000) | Обильный |
Примечание: * при анаэробном культивировании
Ссылки:
1. Kupferberg A.B., Johnson G. and Sprince H.,1948, Proc. Soc. Exper. Biol. Med., 67:304.
2. Williams M.H., 1950, Am. J. Obst. and Gynac., 68:224.
3. Kean B.H. and Day E., 1954, Am. J. Obst. and Gynac., 68:1510.
4. Kupferberg A.B., 1955, Inc. Rec. Med. and Gen. Pract. Clinics, 268:709.
5. Adler S. and Pulvertaft R.J., 1944, Am. Trop. Med., 38:188.
6. Johnson J. G., Trussel M and John. F., 1945, Science, 102:126.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.