Stuart Transport Medium / Medium without Methylene Blue Транспортная среда Стюарта / Транспортная среда Стюарта без метиленового синего

M306 / M306D / М1131

Эту среду рекомендуют для хранения и транспортировки в лабораторию нейссерий и других прихотливых микроорганизмов.

 

Транспортная среда Стюарта (M306), слева направо:
1. тампон с материалом из глотки
2. тампон с материалом из уха
3. Контроль (незасеянная среда)

 

Состав**:

Ингредиенты	М306 грамм/литр	М306D грамм/литр	М1131 грамм/литр
Натрия тиогликолят	1,00	0,90	0,90
Натрия глицерофосфат	10,00	10,00	10,00
Кальция хлорид	0,10	0,10	0,10
Метиленовый синий	0,002	0,002	–
Агар-агар	3,00	3,00	3,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 14,1 г порошка М306 или 14,0 г порошка М306D или М1131 в 1000 мл дважды дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить в пробирки с завинчивающимися колпачками для получения столбика высотой приблизительно 7 см. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин, после чего завинтить колпачки. Остудить пробирки немедленно в вертикальном положении. Необходимо следить за тем, чтобы вода для приготовления среды не содержала хлора.

Принцип и оценка результата:

Эта среда первоначально предложена Stuart (1) для изучения гонококков. Позже (2) среда Стюарта была модифицирована для транспортировки материала, содержащего гонококки. Затем (3) в ее состав были введены тиогликолят натрия и уголь. Эти среды можно использовать для транспортировки многих прихотливых микроорганизмов, включая анаэробов, т.к. на ней сохраняется жизнеспособность и не происходит существенного размножения микроорганизмов (4). В другом исследовании (5) показано, что при добавлении сульфата полимиксина В улучшается выделение гонококков.

Эти среды имеют известный состав, полужидкие и не обладают питательностью, что предупреждает размножение микроорганизмов. Благодаря составу сред можно быть уверенным, что присутствующие микроорганизмы выживут в течение относительно долгого времени. Эти среды имеют достаточную степень анаэробиоза, что можно контролировать по индикатору редокс-потенциала – метиленовому синему. После приготовления стерильная среда будет подвергаться окислению, начиная с верхней части, но если вся она станет голубой, ее не рекомендуется использовать. Натрия глицерофосфат и кальция хлорид придают среде буферные свойства и поддерживают оптимальное осмотическое давление.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий белый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,3%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда бесцветна, ее столбик слегка опалесцирует, а при хранении 10% или менее верхней части имеют голубой цвет.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М306 (1,41% вес/об) и М306D или М1131 (1,4% вес/об) имеют рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 72 ч при 35°С после хранения на среде Стюарта.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Среда для пересева
Haemophilus influenzae (35056)	Имеется	Шоколадный агар*
Neisseria gonorrhoeae (19424)	Имеется	Шоколадный агар*
Streptococcus pneumoniae (6303)	Имеется	Триптон-соевый агар с 5% бараньей крови

Примечание: * - инкубирование в атмосфере углекислого газа.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.