Основа тетратионатного бульона
Tetrathionate Broth Base, Hajna (TT Broth Base) | M327 |
Этот бульон используют в качестве среды обогащения для выделения сальмонелл.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептон специальный | 18,00 |
Дрожжевой экстракт | 2,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
D-Маннит | 2,50 |
Глюкоза | 0,50 |
Натрия дезоксихолат | 0,50 |
Натрия тиосульфат | 38,00 |
Кальция карбонат | 25,00 |
Бриллиантовый зеленый | 0,01 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 91,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц или поместить среду в струю пара на 30 минут. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Остудить до 45°С. Перемешать и добавить 40 мл иодного раствора (8,0 г иодида калия и 5,0 г иода на 40 мл). Тщательно перемешать и разлить по 10 мл в пробирки. После добавления иода среду не подогревать.
Принцип и оценка результата:
Этот бульон вначале был разработан Мюллером (1), который показал, что на ней могут без ограничения расти патогенный кишечные бактерии в условиях селективного подавления колиформных микроорганизмов. Затем среда была модифицирована (2, 3). В данном виде среда предложена Hajna и Daman (4).
Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источником азотистых питательных веществ, витаминов группы В, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. Бриллиантовый зеленый и дезоксихолат подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Глюкоза и маннит являются источником ферментируемых углеводов и способствуют дифференциации патогенных кишечных бактерий, в частности, сальмонелл. Иодный раствор участвует в образовании тетратионата, который подавляет рост нормальной микрофлоры кишечника (5).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок кремового цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-зеленую окраску, опалесцирует, с выраженным белым преципитатом.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (9,15% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний на Агаре МакКонки (М081) |
|---|---|---|
Salmonella typhimurium (14028) | Хороший или обильный | Бесцветные |
Salmonella arizona (13314) | Хороший или обильный | Бесцветные |
Shigella dysenteriae (13313) | Хороший или обильный | Бесцветные |
Escherichia coli (25922) | Средний или хороший | Розовые |
Ссылки:
1. Mueller L., 1923, C.R. Soc. Biol. (Paris), 89:434.
2. Kauffman F., 1930, Zentralb. Bakteriol. Parasitenkd. Infektionskr-Hyg. Abt. I. Orig., 113:148.
3. Knox R., Gell P. and Pollack M., 1942, J. Pathol. Bacteriol, 54:469.
4. Hajna and Daman, 1956, Appl. Microbiol., 4:341.
5. MacFaddin J., 1985, Media for the Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.