Ацетатный агар дифференциальный
Acetate Differential Agar | M339 |
Ацетатный агар дифференциальный используют для дифференциации шигелл и эшерихий.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Натрия ацетат | 2,00 |
Магния сульфат | 0,10 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Аммония дигидрофосфат | 1,00 |
Калия гидрофосфат | 1,00 |
Бромтимоловый синий | 0,08 |
Агар-агар | 20,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 29,18 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды Подогреть суспензию до полного растворения частиц. Разлить по пробиркам в количестве, необходимом для получения скоса и столбика. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в наклонном положении.
Принцип и оценка результата:
Основу среды предложили Trabulsi и Ewing (1), затем она была модифицирована Tatum, Ewing и Weaver (2): цитрат натрия заменили ацетатом натрия. Среда позволяет различать микроорганизмы по способности утилизировать ацетат: утилизация сопровождается развитием синей окраски среды. Trabulsi и Ewing показали, что шигеллы и протеи не способны утилизировать ацетат и расти на этой среде. Большинство штаммов Escherichia coli и близкородственных организмов хорошо вырастают в течение 24-48 ч, но некоторые штаммы либо совсем не утилизируют ацетат в качестве единственного источника углерода, либо растут очень медленно (дают отрицательный результат). Утилизация ацетата (положительный результат) сопровождается щелочением среды и, соответственно, изменением цвета индикатора с зеленого на синий.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желто-зеленый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 2%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет изумрудно-зеленую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,92% вес/об) имеет рН 6,7 ± 0,2
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 1-7 дней при 25 ± 2°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Утилизация ацетата |
|---|---|---|
Citrobacter freundii (8090) | Хороший или обильный | + |
Enterobacter cloacae (23355) | Хороший или обильный | + |
Escherichia coli (25922) | Хороший или обильный | + |
Klebsiella pneumoniae (13883) | Хороший или обильный | + |
Salmonella “arizonae”(13314) | Хороший или обильный | + |
Salmonella typhi (19430) | Отсутствует | – |
Shigella sonnei (25931) | Отсутствует | – |
Proteus vulgaris (13315) | Отсутствует | – |
Примечание:
"+" - изменение окраски среды с зеленой на синюю;
"–" - цвет среды остается зеленым.
Ссылки:
1. Trabulsi L.R. and Ewing W.H. 1962, Publ. Hlth. Lab., 20:137.
2. Tatum, H.W., Ewing W.H. and Weaver, R.E., 1974, Manual of Clinical Microbiology, 2nd ed., American Society for Microbiology, Washington D.C., PP 270.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.