Littman Oxgall Agar / Broth Base Основа агара Литтмана / Основа бульона Литтмана (для грибов)

M373 / M663

Эти среды с добавлением стрептомицина используют для селективного обогащения и культивирования грибов.

Состав**:

Ингредиенты	М373 грамм/литр	М663 грамм/литр
Пептический перевар животной ткани	10,00	10,00
Диастаза	10,00	10,00
Oxgall	15,00	15,00
Кристаллический фиолетовый	0,01	0,01
Агар-агар	20,00	–
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 55,0 г порошка М373 или 35,0 г порошка М663 в 1000 мл дистиллированной воды. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично добавить стерильный раствор стрептомицина (до конечной концентрации 30 мкг/мл).

Принцип и оценка результата:

Эти среды предложены Littman (1) и используются для первичного выделения (агар) и селективного обогащения грибов, особенно дерматофитов (бульон). Их можно использовать для оценки содержания грибов в нормальных фекалиях или мокроте. Агаровую среду используют для подсчета сапрофитных грибов в материале от персонала пищевых объектов, в воздухе и почве.

Кристаллический фиолетовый и стрептомицин подавляют рост большинства бактерий. Oxgall ограничивает разрастание колоний грибов. Нейтральное значение рН способствует росту многих патогенных грибов. По данным Литтмана (2), на этой среде выделяется в 3 раза больше грибов, чем на Глюкозном агаре Сабуро. Агар Литтмана рекомендован также специалистами АРНА (3).

Частицы кожи, ногтей или инфицированных волос непосредственно засевают на поверхность агара, мокроту, фекалии и другой материал, отобранный стерильным тампоном, распределяют по поверхности агара или вначале «подращивают» в бульоне, а затем пересевают на агар. Посевы инкубируют до 8 суток. В случае Nocardia asteroides, Streptomyces spp. или чувствительных к стрептомицину микроорганизмов культивирование ведут на среде без добавления стрептомицина.

Наилучшие результаты получают, если в чашки налито около 30 мл среды. Перед использованием чашки рекомендуется выдержать около 6 ч при комнатной температуре.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю (М373).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет синюю окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М373 (5,5% вес/об) или М663 (3,5% вес/об) имеют рН 7,0 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 30°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост на основной среде	Среда со стрептомицином
Aspergillus flavus (22547)	Обильный	Обильный
Microsporum audouinii (9079)	Обильный	Обильный
Escherichia coli (25922)	Обильный	Подавляется
Candida albicans (10231)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Saccharomyces cerevisiae (9763)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Sacharomyces uvarum (9080)	Хороший или обильный	Хороший или обильный
Trichophyton rubrum	Хороший	Хороший

Ссылки:

1. Littman M. L., 1947, Science, 106:109.
2. Littman M. L., 1948, Am. J. Clin. pathol., 18:409.
3. Diagnostic Procedures and Reagents, 1950, 3rd ed., APHA for Isolation of Pathogenic fungi. pg. 452.
4. MacFaddin J. F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol.1, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.