Основа желточно-теллуритного агара
TPEY Agar Base | М402 |
Этот агар с добавками рекомендуют для выделения и подсчета коагулазоположительных стафилококков из пищевых продуктов.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 10,00 |
Дрожжевой экстракт | 5,00 |
D-Маннит | 5,00 |
Натрия хлорид | 20,00 |
Лития хлорид | 2,00 |
Агар-агар | 18,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Тщательно размешать 60,0 г порошка в 900 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,9 атм (118°С) в течение 15 мин. Остудить среду до 50°С и асептично добавить 10 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия (FD052), 100 мл эмульсии яичного желтка (FD045) и полимиксин В (до конечной концентрации 4 мг/л). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Предупреждение: Хлорид лития ядовит, поэтому следует избегать вдыхания порошка и попадания его на кожу. Для удаления его рекомендуется немедленно промыть кожу большим количеством воды.
Принцип и оценка результата:
Желточный агар с теллуритом и полимиксином предложили Crisley и соавт. для определения и подсчета коагулазоположительных стафилококков в пищевых материалах (1, 2,). Для выделения коагулазоположительных стафилококков из пищевых продуктов, воздуха, пыли и почвы необходимо сильно подавлять рост коагулазоотрицательных стафилококков и других микроорганизмов.
Гидролизат казеина, дрожжевой экстракт и D-маннит служат источником энергии для коагулазоположительных стафилококков, адаптированных к утилизации углевода. Хлорид лития, теллурит калия и полимиксин В подавляют рост широкого спектра бактерий, включая некоторых коагулазоотрицательных стафилококков. Коагулазоположительные стафилококки образуют четкие черные или темно-серые колонии с зонами преципитации яичного желтка или прозрачной зоной вокруг колонии с преципитацией в агаре под колонией. Коагулазоотрицательные микроорганизмы могут образовывать мелкие (точечные) черные колонии без преципитации или просветления вокруг колоний.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,8%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует. После добавления эмульсии яичного желтка и теллурита калия она становится желтой и непрозрачной, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (6,0% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний | Зона (лецитиназа) |
|---|---|---|---|
Staphylococcus aureus (25923) | Обильный | Черный | + |
Staphylococcus epidermidis (12228) | Слабый или средний | Черный | – |
Bacillus subtilis (6633) | Слабый или средний | Коричневый | – |
Proteus mirabilis (25933) | Слабый или средний | Коричневый | – |
Escherichia coli (25922) | Подавляется | – | – |
Streptococcus pyogenes (19615) | Подавляется | – | – |
Ссылки:
1. Crisley, Angelotti and Foter, 1964, Public Health Rep., 79:369.
2. Crisley, Peeler and Angelotti, 1965, Appl. Microbiol., 13:140.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.