Солодово-дрожжевой агар / бульон
Yeast Malt Agar / Broth | М424 / М425 |
Эти среды рекомендуют для выделения и культивирования дрожжевых, плесневых грибов и других кислотолюбивых микроорганизмов.
Состав**:
Ингредиенты | М424 грамм/литр | М425 грамм/литр |
|---|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 5,00 | 5,00 |
Дрожжевой экстракт | 3,00 | 3,00 |
Солодовый экстракт | 3,00 | 3,00 |
Глюкоза | 10,00 | 10,00 |
Агар-агар | 20,00 | – |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 41,0 г порошка М424 или 21,0 г порошка М425 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Для приготовления селективной среды закислить среду до 3,0-4,0 или добавить антибиотики. После добавления антибиотиков или кислоты среду НЕ НАГРЕВАТЬ.
Принцип и оценка результата:
Эти среды готовят по прописи, предложенной Wickerham (1, 2) для выделения и культивирования дрожжевых, плесневых грибов и других кислотолюбивых микроорганизмов.
При необходимости подсчитать количество дрожжевых клеток в смешанных популяциях к среде можно добавить фунгистатик, например, пропионат или дифенил натрия, которые подавляют рост плесневых грибов.
Wickerham предложил использовать Солодово-дрожжевой бульон для обогащения дрожжевых грибов, наслаивая поверх засеянной среды около 1 см стерильного парафинового масла. После подращивания культуру рассевают на агаровой среде для получения изолированных колоний. Для выделения как ферментирующих, так и окисляющих штаммов, закисленный Солодово-дрожжевой бульон помещают на 1-2 дня на «качалку», что препятствует спорообразованию плесневых грибов и способствует росту дрожжевых грибов, которые можно выделить после штрихового посева на агаровой среде.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 2,0%-ному агаровому гелю (М424).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-янтарную окраску, слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М424 (4,1% вес/об) или М425 (2,1% вес/об) имеют рН 6,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-72 ч при 25-30°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост при рН 3,4 | Рост при рН 6,2 |
|---|---|---|
Aspergillus niger (16404) | Хороший или обильный | Хороший или обильный |
Candida albicans (10231) | Хороший или обильный | Хороший или обильный |
Saccharomyces cerevisiae (9763) | Хороший или обильный | Хороший или обильный |
Lactobacillus leichmannii (4797) | Слабый | Хороший или обильный |
Escherichia coli (25922) | Подавляется | Хороший или обильный |
Ссылки:
1. Wickerham, 1939, J. Tropical Med. Hyg., 42:176.
2. Wickerham, 1951, U.S. Dept. Agric. Tech. Bull. No. 1029.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.