Агар Фогета-Фредетта для выделения анаэробов
Forget Fredette Agar | М431 |
Эту среду используют для селективного выделения анаэробов из смешанных культур (ассоциаций) аэробов и анаэробов.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 17,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 3,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Глюкоза | 2,50 |
Калия гидрофосфат | 2,50 |
Натрия азид | 0,50 |
Агар-агар | 10,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 40,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. При необходимости добавить 3,0 г или более агар-агара. Подогреть с частым помешиванием для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,5 атм (110°С) в течение 25 мин или при 0,9 атм (118°С) в течение 12 мин.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата:
Эта среда основана на прописи Fredette и Forget (1, 2) и для селективного выделения анаэробов из смешанных культур (ассоциаций) аэробов и анаэробов. Авторы применяли данный агар для изучения анаэробной микрофлоры при хроническом синусите.
Гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки и глюкоза являются источником необходимых питательных веществ для роста анаэробов. Фосфат придает буферные свойства среде. Азид натрия подавляет рост не только грамотрицательных кокков и палочек, но и большинства грамположительных аэробных микроорганизмов. На этом агаре в глубине среды в пробирке растут клостридии, фузобактерии, стрептококки и некоторые другие бактерии (Ristella spp., Sphaerophorus spp.). Бациллы, листерии и большинство грамотрицательных бактерий на этой среде не растут. Ее можно применять также для поверхностного культивирования анаэробов в анаэробных контейнерах (в чашках), но в этом случае к среде перед стерилизацией рекомендуется добавить 4,0 г агар-агара.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,05% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Clostridium perfringens (12924)* | Хороший или обильный |
Streptococcus pneumoniae (6303) | Хороший или обильный |
Примечание: * - при культивировании в анаэробных условиях.
Ссылки:
1. Fredette, Auger and Forget, 1961, Can. Med. A.J., 84:164.
2. Forget and Fredette, 1962, J. Bact., 83:121.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.