Среда Робинзона для амеб
Robinson Medium for Entamoeba (Twin Pack) | M459 |
Выросшая на данной среде культура Escherichia coli служит субстратом для роста амеб.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Часть А | |
Лимонная кислота | 20,00 |
Аммония сульфат | 10,00 |
Магния сульфат | 0,50 |
Калия дигидрофосфат | 5,00 |
Натрия хлорид | 50,00 |
Бромтимоловый синий | 0,001 |
Часть В | |
Молочная кислота | 40,00 мл |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 85,5 г порошка части А в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 40 мл части В (молочной кислоты). Этот раствор можно хранить без стерилизации в течение 4 недель. Для использования надо развести среду в 10 раз путем добавления 900 мл дистиллированной воды к 100 мл среды. Подвести рН до 7,0 ± 0.2 с помощью 10 N-го раствора гидроксида натрия и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до комнатной температуры и засеять в среду Escherichia coli штамм В.
Принцип и оценка результата:
Эту среду готовят в соответствии с прописью Robinson (1). Ее используют для выращивания Escherichia coli. Робинзон описал очень чувствительный метод культивирования Entamoeba histolytica, включающий выращивание кишечной палочки на определенной среде с последующим посевом на косячки солевого агара, куда предварительно засевают пробу фекалий; для выращивания амеб в среду вносятся также различные питательные вещества (1, 2). Лимонная и молочная кислоты являются источником углерода, а сульфат аммония – источником органического азота для роста бактерий; хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление. Фосфаты забуферивают среду, а бромтимоловый синий является индикатором рН.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Часть А: Гомогенный сыпучий белый порошок.
Часть В: Бесцветная жидкость.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-желтую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (0,85 вес/об), содержащий 4% молочной кислоты, имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 37°С .
Штамм микроорганизмов | Рост |
|---|---|
Escherichia coli штамм В | Хороший |
Ссылки:
1. Robinson G.L. (1968) Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene 62:285-294.
2. W.H.R. Lumsden and McMillan (1989). In Mackie and MaCartney Practical Medical Microbiology, 13th ed., vol.2 pp 700-734
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке.