Основа модифицированной среды для трихомонад
Trichomonas Modified CPLM Medium Base | М460 |
Эту среду с добавками лошадиной сыворотки и антибиотиков рекомендуют для культивирования трихомонад
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 32,00 |
Печеночный перевар | 20,00 |
Мальтоза | 1,60 |
L-Цистеина гидрохлорид | 2,40 |
Раствор Рингера, разведенный в 4 раза | до 1 литра |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 56,0 г порошка в 900 мл стерильной дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить во флаконы по 90 мл. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 10 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить на каждые 90 мл среды следующее.
1.Стерильную инактивированную сыворотку крови лошади | 10 мл |
2.Стерильный пенициллин-стрептомициновый раствор | 1 мл |
3.Стерильный раствор нистатина | 1 мл |
Тщательно перемешать и асептично разлить в необходимом количестве.
Состав пенициллин-стрептомицинового раствора:
Пенициллин | 100 000 ЕД |
Стрептомицин | 0,1 г |
Стерильной дистиллированной воды | 10 мл |
Состав раствора нистатина:
Нистатин | 500 00 ЕД |
Стерильной дистиллированной воды | 10 мл |
Для обычных пересевов антибиотики добавлять не надо, но для диагностических исследований и получения чистой культуры это важно.
Принцип и оценка результата:
Эта среда готовится на основе прописи среды Джонсона и Трасселя (1), но в ней нет агар-агара и метиленового синего (2).
Пептический перевар животной ткани и печеночный перевар служат источником азотистых питательных веществ, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. L-Цистеина гидрохлорид является редуцирующим веществом. Антибиотики подавляют рост бактерий, способствуя росту простейших. Для культивирования в анаэробных условиях требуется вносить массивный инокулюм.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет коричневато-желтый цвет, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,6% вес/об) имеет рН 6,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штамма через 4 дня при 37°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Trichomonas vaginalis (30001) | Хороший или обильный |
Ссылки:
1. Johnson G. and Trussell R.E., 1943, Proc. Soc. Exp. Biol., 54:245.
2. Mackie and McCartney’s Practical Medical Microbiology, 1989, 13th ed., Vol. 2, Churchill Livingstone, London.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.