Обогатительный бульон для стрептококков
Streptococcus Enrichment Broth (SE Broth) | M465 |
Этот бульон используют для обогащения стрептококков.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 20,00 |
Дрожжевой экстракт | 5,00 |
Бычья желчь | 10,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Натрия цитрат | 1,00 |
Эскулин | 1,00 |
Железа аммонийного цитрат | 0,50 |
Натрия азид | 0,25 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 42,8 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить по 9 мл в пробирки для тестирования. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 20 мин.
Предупреждение: Азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата:
Способность энтерококков гидролизовать эскулин установил Rochaix (1). Такой способностью не обладают другие стрептококки. Facklam и Moody (2) предложили использовать для предварительной идентификации стрептококков группы D тест с желчью и эскулином. Среда позже была модифицирована (3) путем уменьшения количества желчи и добавления азида натрия.
Гидролизат казеина и дрожжевой экстракт обеспечивают присутствие соединений азота и углерода, микроэлементов, витаминов группы В и других веществ, необходимых для роста стрептококков группы D. Эти микроорганизмы (включая энтерококков) гидролизуют эскулин до глюкозы и эскулетина. Последний, взаимодействуя с цитратом аммонийного железа, образует комплекс темно-коричневого или черного цвета (4). Бычья желчь подавляет рост грамположительных бактерий, не относимых к стрептококкам группы D. Азид натрия подавляет рост грамотрицательных бактерий.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, с голубоватым оттенком.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,28% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Enterococcus faecalis (29212) | Хороший или обильный | Черный |
Escherichia coli (25922) | Подавляется | – |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Rochaix, 1924, C.R. Soc. Biol., 90:771.
2. Facklam and Moody, 1970, Appl. Microbiol., 20:245.
3. Isenberg, Goldberg and Sampson, 1970, Appl. Microbiol., 20:433.
4. MacFaddin J., 1980, Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria, 2nd ed., Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.