Желчно-эскулиновый агар с азидом натрия
Bile Esculin Azide Agar | М493 / M493I |
Эта среда является селективной и используется для выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков (энтерококков).
Состав**:
Ингредиенты | М493 грамм/литр | М493I грамм/литр |
|---|---|---|
Гидролизат казеина | 17,00 | 17,00 |
Пептический перевар животной ткани | – | 3,00 |
Протеозопептон | 3,00 | – |
Дрожжевой экстракт | – | 5,00 |
Мясной экстракт | 5,00 | – |
Oxgall | 10,00 | 10,00 |
Натрия хлорид | 5,00 | 5,00 |
Эскулин | 1,00 | 1,00 |
Железа аммонийного цитрат | 0,50 | 0,50 |
Натрия азид | 0,15 | 0,15 |
Агар-агар | 15,00 | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) | 7,1 ± 0,2 | 7,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 56,65 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата:
Вначале Swan (1) разработал желчно-эскулиновый агар, который в дальнейшем оценивали и модифицировали другие исследователи (2, 3). С небольшими изменениями он рекомендован комитетом ISO (4). Эти среды являются селективными для стрептококков группы Д и обеспечивают их быстрый рост.
Среда высокопитательна, поскольку содержит гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, протеозопептон, дрожжевой экстракт и мясной экстракт. Азид натрия подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов, но позволяет расти фекальным стрептококкам. Гидролиз эскулина и толерантность к желчи позволяют выделять и идентифицировать стрептококкам группы Д в течение 24 ч.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует с голубым оттенком, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М493 (5,67% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2; водный раствор М493I (5,67% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С.
Штамм микроорганизмов (АТСС) | Рост | Гидролиз эскулина |
|---|---|---|
Enterococcus faecalis (29212) | Обильный | + |
Streptococcus bovis (27960) | Обильный | + |
Proteus mirabilis (25933) | Обильный | – |
Staphylococcus aureus (25923) | Хороший | – |
Streptococcus pyogenes (19615) | Слабый или отсутствует | – |
Примечание:
"+" – почернение среды;
"–" – цвет не изменен
Ссылки:
1. Swan, 1954, J. Clin. Pathol., 7:160.
2. Facklam and Moody, 1970, Appl. Microbiol., 20:245.
3. Isenberg, 1970, Clin. Lab. Forum, July.
4. International Organization for Standardization (ISO), 1984, Draft, ISO/DIS 7899.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.