Trichophyton Media Среды для дифференциации трихофитонов (агары 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7)

M531/M532/M533/M534/M535/M536/M152

Эти среду рекомендуют для дифференциации грибов рода Trichophyton.

Состав**:

Ингредиенты	Кол-во (г/л) в составе сред
	Trichophyton
	Agar 1	Agar 2	Agar 3	Agar 4	Agar 5	Agar 6	Agar 7
	M531	M532	M533	M534	M535	M536	M152
Гидролизат казеина, свободный от витаминов	2,5	2,5	2,5	2,5	2,5	–	–
Глюкоза	40,0	40,0	40,0	40,0	40,0	40,0	40,0
Калия дигидрофосфат	1,8	1,8	1,8	1,8	1,8	1,8	1,8
Магния сульфат	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1	0,1
Инозит	–	0,05	0,05	–	–	–	–
Тиамина гидрохлорид	–	–	0,0002	0,0002	–	–	–
Аммония нитрат	–	–	–	–	–	1,5	1,5
L-Гистидина гидрохлорид	–	–	–	–	–	–	0,03
Никотиновая к-та	–	–	–	–	0,002	–	–
Агар-агар	15,0	15,0	15,0	15,0	15,0	15,0	15,0
Расход сухой среды (г/л)	59,4	59,45	59,45	59,4	59,4	58,4	58,43

Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать соответствующее количество порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц, разлить в пробирки и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в наклонном положении для формирования скоса.

Принцип и оценка результата:

Этот селективный агар рекомендован для дифференциации представителей рода Трихофитон и готовится в соответствии с прописью George и Camp (1). Состав сред основан на питательных потребностях трихофитонов различных видов. Эти грибы включают сапрофитные виды, а также условно-патогенные, входящие в группу дерматофитов, которые паразитируют на коже, волосах и ногтях человека, а также поражают животных. Трихофитон вызывает у человека заболевание, называемое стригущим лишаем, и другие трихофитии. George и Camp разделили трихофитонов на 4 группы. В 1-ю группу вошли T. concentricum, T. schoenleinii и T. verrucosum. Данные виды редко образуют споры или своеобразные пигменты. Ввиду того, что их колонии проявляют внешнее сходство невооруженным глазом их невозможно дифференцировать. Их различают по отношению к инозиту и тиамину. Более быстрый рост T. verrucosum при 37°С, нежели, чем при комнатной температуре, является их дополнительным отличительным признаком (рост T. schoenleinii и T. concentricum при 37°С не улучшается).

Во 2-ю группу вошли T. tonsurans, T. mentagraphytes и T. rubrum. Обычно они образуют микроконидии, а иногда – макроконидии. По виду и цвету колоний представители этих видов весьма варьируют, поэтому их дифференциация по культуральным свойствам довольно сложна. Ajello и George (2) предложили дифференцировать эти виды с использованием трихофитонных агаров 1 и 4, а также культивирования волос. В течение 2-3 недель в исследуемых волосах, суспензированных в воде, T. mentagraphytes образует перфорирующие органы, тогда как гриб вида T. rubrum неспособен к таким изменениям.

Третью группу представляет вид T. violaceum, который редко образует микроконидии, но формирует колонии, окрашенные особым пигментом. Питательные потребности этого вида сходны с таковыми у T. tonsurans, но их рост медленный даже в присутствии тиамина; колонии их гладкие, без спор. T. Tonsurans растут быстрее в присутствии тиамина и образуют большое количество микроконидий.

В 4-ю группу включены виды T. megninii и T. equinum, которые можно дифференцировать по питательным потребностям: первый нуждается в гистидине, второй – в никотиновой кислоте.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий белый или желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы (5,84% вес/об для сред M152 и M536 или 5,94% вес/об для сред M531, M532, M533, M534, M535) имеют рН 6,8 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2 недели при 30°С на агаре 1.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Trichophyton rubrum	Хороший или обильный
Trichophyton mentagrophytes (9533)	Хороший или обильный
Trichophyton violaceum	Отсутствует или слабый
Trichophyton equinum (22443)	Отсутствует

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2 недели при 30°С на агарах 2,3,4.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Trichophyton rubrum	Обильный
Trichophyton mentagrophytes (9533)	Обильный

Ростовые характеристики референс-штамма через 2 недели при 30°С на агаре 5.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост
Trichophyton equinum (22443)	Хороший или обильный

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2 недели при 30°С на агаре 6.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
M. gallinae	Хороший или обильный
Trichophyton megnini	Подавляется

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2 недели при 30°С на агаре 7.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
M. gallinae	Хороший
Trichophyton megnini	Хороший

Ссылки:

1.George and Camp. 1957, J. Bact., 74:113.
2.Ajello and George, 1957, Mycopath, J. Mycol. Appl. 7:3.
3.Atlas R.M. 1993, Handbook of Microbiological Media, CRC Press, London.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.