Среда для вибрионов (Холерная среда)
Cholera Medium | M558 |
Данную среду используют для выделения видов Vibrio из материала, обильно контаминированного энтеробактериями.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 10,00 |
Мясной экстракт | 10,00 |
Сахароза | 10,00 |
Натрия додецилсульфат | 0,10 |
Натрия хлорид | 20,00 |
Натрия карбонат | 5,00 |
Агар-агар | 10,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 8,5 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 65,1 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Остудить до 70°С и добавить 2 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия (FD052) и 5 мл стерильной дефибринированной крови. Выдержать при той же температуре несколько минут. Остудить до 50°С и разлить в чашки.
Принцип и оценка результата:
Данный агар является селективной средой, которую используют для выделения видов Vibrio из материала, обильно контаминированного энтеробактериями. Он основан на прописи, предложенной Felsenfeld и Watanabe (1) для выделения Vibrio cholerae и других вибрионов из материала, обильно контаминированного энтеробактериями. Более ранние попытки приготовить такую среду были безуспешными из-за сложного приготовления или низкой селективности сред.
Пептический перевар животной ткани и мясной экстракт служат источником питательных веществ, тогда как сахароза является субстратом для ферментирования вибрионами. Додецилсульфат натрия подавляет рост сопутствующей микрофлоры. Теллурит калия также подавляет рост многих грамположительных и грамотрицательных бактерий (кроме вибрионов). Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление в среде.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет вид желтого слегка опалесцирующего геля. После добавления теллурита и крови с последующим прогреванием готовая среда приобретает коричневато-красную окраску.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (6,5% вес/об) имеет рН 8,5 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики штаммов через 18-24 ч при 37°С.
Штаммы микроорганизмов | Рост |
|---|---|
Vibrio cholerae (15748) | Обильный |
Vibrio parahaemolyticus (17802) | Обильный |
Bacillus subtilis (6633) | Подавляется |
Escherichia coli (25922) | Подавляется |
Pseudomonas aeruginosa (27853) | Подавляется |
Proteus mirabilis (25933) | Подавляется |
Ссылки:
1. Felsenfeld O. and Watanabe Y., 1958, U.S. Armed Forces Med. J., 9(7):975.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.