Columbia C.N.A. Agar / Columbia C.N.A. Agar (with 1% Agar) Колумбийский агар для грамположительных кокков (C.N.A.) / Колумбийский агар для грамположительных кокков (C.N.A.) с 1% агар-агара

М560 / M560A

Эта среда используется для селективного выделения «патогенных» грамположительных кокков из клинического и другого материала.

Состав**:

Ингредиенты	М560 грамм/литр	М560А грамм/литр
Биопептон	20,00	20,00
Триптический перевар говяжьего сердца	3,00	3,00
Крахмал кукурузный	1,00	1,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Колистина сульфат	0,01	0,01
Налидиксовая кислота	0,015	0,015
Агар-агар	15,00	10,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 44,0 г порошка М560 или 39,0 г порошка М560А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично внести стерильную дефибринированную кровь барана (до 5% об/об). Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эту среду готовят по модифицированной прописи колумбийского агара, который разработали Ellner и соавт.(1). Комбинация пептонов обеспечивает быстрый и обильный рост на ней даже прихотливых микроорганизмов. Кроме того, на ней вырастают типичные колонии, лучше проявляется пигментообразование и более четкие гемолитические реакции. Ellner и соавторы нашли, что на этой среде с 5% бараньей крови, 10 мкг/мл колистина и 15 мкг/мл налидиксовой кислоты подавляется рост протеев, клебсиелл и псевдомонад, но не стафилококков, гемолитических стрептококков или энтерококков. Колистин и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных бактерий, повреждая их мембрану и нарушая репликацию ДНК, соответственно (2).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному (М560) или 1%-ному (М560А) агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Основа среды имеет желтую окраску, слегка опалесцирует при затвердевании. После добавления к основе стерильной дефибринированной крови (до 5% об/об) среда имеет вишнево-красный цвет и опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М560 (4,4% вес/об) или М560А (3,9% вес/об) имеют рН 7,3 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35-37°С.

Штамм микроорганизмов (АТСС)	Рост	Гемолиз
Staphylococcus aureus (25923)	Обильный	Бета или гамма
Staphylococcus epidermidis (12228)	Обильный	Гамма
Streptococcus pneumoniae (6303)	Обильный	Альфа
Streptococcus pyogenes (19615)	Обильный	Бета
Escherichia coli (25922)	Подавляется	–
Neisseria meningitidis (13090)	Подавляется	–

Ссылки:

1. Ellner et al, 1966, Am. J. Clin. Path., 45:502.
2. Estevez, 1984, Lab. Med., 15:258.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.