Listeria Enrichment Broth / Selective Agar (Twin Pack) Бульон обогащения для листерий / Селективный агар для листерий (двухкомпонентные среды)

М569 / M567

Эти среды используют для культивирования и селективного обогащения видов Listeria из клинического материала. 

Состав**:

Ингредиенты	М569 грамм/литр	М567 грамм/литр
Часть А:
Гидролизат казеина	10,00	10,00
Пептический перевар животной ткани	10,00	10,00
Глюкоза	1,00	1,00
Натрия хлорид	5,00	5,00
Тиамина дихлорид	0,005	0,005
Акрифлавина гидрохлорид (Трипафлавин)	0,01	0,01
Налидиксовая кислота	–	0,04
Агар-агар	–	13,00
Часть В:
Калия роданид	37,50	37,50
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 26,0 г порошка части А (М569) или 39,0 г порошка части А (М567) и 37,5 г порошка части В в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин.

Принцип и оценка результата:

Эти среды предложены Feindt (1) для культивирования и выделения видов Listeria из клинического и другого материала. Obiger и Schonberg (2) показали преимущества этих сред при выделении листерий из смешанных культур.

Гидролизат казеина и пептический перевар животной ткани являются источником необходимых питательных веществ для роста листерий. Тиамин (витамин группы В) стимулирует рост листерий. Роданид и налидиксовая кислота подавляют рост грамотрицательных бактерий (3, 4). Как показал Bockemuhl (5), комбинация селективных веществ и акридиновых красителей подавляет рост энтерококков. Для выделения листерий Ralovich (6), Kampelmacher и Van Noorle Jansen (7) рекомендовали применять комбинацию акрифлавина гидрохлорида и налидиксовой кислоты. Бульон обогащения для листерий можно улучшить, добавив в него, помимо налидиксовой кислоты, колимицин (8). Контаминированные образцы засевают в Бульон обогащения для листерий непосредственно или проводят холодовое обогащение (9) в Триптозном бульоне (М179), после чего культуры отсевают на Селективный агар для листерий. Гемолиз можно проверить путем высева на Кровяной агар (М073).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Часть А:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Часть В:

Гомогенный сыпучий белый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,3%-ному агаровому гелю (М567).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М567 (3,9% вес/об части А + 3,75% вес/об части В) и М569 (2,6% вес/об части А + 3,75% вес/об части В) имеют рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 37°С (при возможности, в услових атмосферы, содержащей 10% углекислого газа).

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Listeria monocytogenes (19112)	Обильный
Enterococcus faecalis (29212)	Отсутствует или слабый
Escherichia coli (25922)	Подавляется

Ссылки:

1. Feindt E., 1972, Inuug. Diss., Wurzburg.
2. Obiger G. and Schonberg A., 1973, Fleischwirtschaft, 10:1450.
3. Lebnert C., 1964, Arch. Exp. Vet. Med., 18:891 and 1247.
4. Beerens H. and Tahon-Castel M.M., 1966, Ann. Inst. Pasteur, 111:90.
5. Bockemuhl J., Seeliger H.P.R. and Kathke R., 1971, J. Med. Microbiol. Imm. 157:84.
6. Ralorich B., et al, 1971, Zbl. Bakt. I.Orig., 216:88.
7. Kampelmacher E.H. and Van Noorle-Jansen L.M., 1972, Zbl. Bakt. J. Orig., 221:139.
8. Le Guilloux M., 1980, Bull. Soc. Vet. Prat. de France, 64:45.
9. Grey M.L. et al, 1948, J. Bact., 55:471.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.