Дифференциальный агар по Енезу
Salmonella Agar Onoz | М573 |
Этот агар используют для культивирования сальмонелл.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 6,80 |
Дрожжевой экстракт | 3,00 |
Мясной экстракт | 6,00 |
Лактоза | 11,50 |
Сахароза | 13,00 |
Желчные соли, смесь | 3,825 |
Натрия цитрат (х 5,5 Н2О) | 9,30 |
Натрия тиосульфат (х 5 Н2О) | 4,25 |
L-Фенилаланин | 5,00 |
Натрия гидрофосфат (х 2 Н2О) | 1,00 |
Железа цитрат | 0,50 |
Магния сульфат | 0,40 |
Бриллиантовый зеленый | 0,00166 |
Нейтральный красный | 0,022 |
Анилиновый синий | 0,250 |
Метахромовый желтый | 0,47 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,1 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 80,31 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ СРЕДУ. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Агар разработан Onoz (1) для быстрого определения сальмонелл и шигелл в клиническом материале.
Пептический перевар животной ткани, мясной и дрожжевой экстракты служат источником азотистых питательных веществ, витаминов группы В, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. Лактоза и сахароза являются источником ферментируемых углеводов. Желчные соли, бриллиантовый зеленый и цитрат натрия подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Тиосульфат натрия и цитрат железа являются индикатором образования сероводорода, окрашивая центр соответствующих колоний в черный цвет. Энтеробактерии, ферментирующие лактозу и сахарозу, частично подавляются на данной среде, а те, которые растут, можно отличить по цвету колоний, так как они окрашиваются индикаторами – нейтральным красным и анилиновым синим. Протеи дезаминируют фенилаланин с образованием фенилпирувата, который с ионами железа формирует комплекс темно-коричневого цвета. Кроме того, фенилаланин нейтрализует действие хлорамфеникола, поэтому можно определять сальмонеллы в материале от больных, принимающих хлорамфеникол.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет цвет зеленого бутылочного стекла, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (8,03% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Enterobacter aerogenes (13048) | Обильный | Голубоватые или красноватые, с колечком преципитации вокруг |
Pseudomonas aeruginosa (27853) | Обильный | Грязно-желтые или зеленоватые |
Proteus mirabilis (25933) | Обильный | Темно-коричневые или черные |
Salmonella typhi (6539) | Обильный | Желтые, возможен черный центр |
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | Желтые с черным центром |
Shigella flexneri (12022) | Обильный | Голубоватые |
Escherichia coli (25922) | Слабый или хороший | Голубые с преципитацией желчи |
Klebsiella pneumoniae (13883) | Слабый или хороший | Сине-серые с голубой преципитацией вокруг колоний |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. oNoZ E., Hoffmann K., 1978, Zbl. Bakt. Hyg., I. Abt. Orig., A240:16.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.