Основа агара O.P.S.P. для Clostridium perfringens
Perfringens Agar Base (O.P.S.P.) | M579 |
Этот агар с селективными добавками используют в качестве селективной среды для выделения и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 15,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 |
Дрожжевой экстракт | 5,00 |
Печеночный экстракт | 7,00 |
Железа аммонийного цитрат | 1,00 |
Натрия гидросульфит | 1,00 |
Трис-буфер | 1,50 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,3 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 25,25 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD011 и 1 флакончика с добавкой FD012. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Агар основан на прописи, разработанной Хэндфордом (1) и используется в качестве селективной среды для выделения и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах (2).
Гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой и печеночный экстракты обеспечивают среду азотистыми веществами, витаминами группы В и микроэлементами для роста Clostridium perfringens. Гидросульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему на восстановление сульфита Clostridium perfringens, которые образуют черные колонии. Трис придает среде буферные свойства. Селективные свойства среды обусловлены антибиотиками и сульфаниламидом (блеандомицин, полимиксин В и сульфадиазин), которые подавляют рост не относимых к клостридиям сульфитредуцирующих бактерий (сальмонелл, бацилл, протеев, стафилококков и пр.).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет янтарную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,05% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Clostridium perfringens (12924) | Обильный | Черные |
Enterococcus faecalis (29212) | Отсутствует или слабый | Белые, если растут |
Clostridium butyricum (9690) | Подавляется | – |
Clostridium bifermentans | Подавляется | – |
Bacillus subtilis (6633) | Подавляется | – |
Proteus vulgaris (13315) | Подавляется | – |
Salmonella typhi (6539) | Подавляется | – |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Handford P.M., 1974, J. Appl. Bact., 37 : 559.
2. Hauschild A.H.W. et al, 1977, ICMSF Methods Studies VIII, Can. J. Microbiol., 23:884.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.